2-8℃避光

长期不用分装后-20℃避光保存，避免反复冻融。

一年

酶标仪

动物细胞

1.使用方便：仅使用单一试剂；
2.灵敏度高，数据可靠，重现性好，线性范围更宽；
3.结果稳定：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠；
4.无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低；
5.适合于高通量药物筛选。

酶标仪

1.带有450nm滤光片的酶标仪 2. CO2培养箱

1.PBS 2.纯水

1.移液器及吸头 2.96孔培养板

1.本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3.禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4.样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5.最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6.避免皮肤或粘膜与试剂接触。

细胞活性、细胞增殖-毒性检测
1、收集细胞，加细胞悬液100ul（约5000-10000个细胞）到96孔板（边缘孔用无菌水或PBS填充）。每板设对照（加100l培养基）。
2、置37℃，5% CO2孵育过夜，倒置显微镜下观察。
3、每孔加入10 ul 待检测药物溶液， 37℃孵育。
4、每孔加入10 ul CCK-8溶液，37℃孵育1-4 小时。
5、测定450 nm各孔的吸光值，如无450nm滤光片，可以使用450-490nm的滤光片。
6、同时设置空白孔（培养基和CCK-8溶液，无细胞），对照孔（不加药培养基和CCK-8溶液，有细胞），每组设定3-5复孔。


细胞活力计算：
将各测试孔的OD值减去调零孔OD值或对照孔OD值。各重复孔的OD值取平均数。
细胞活力% =（（加药细胞OD - 空白OD）/（对照细胞OD - 空白OD））×100
抑制率% = （（对照细胞OD - 加药细胞OD）/（对照细胞OD - 空白OD））×100

1.如果OD值偏低，可以适当增加细胞数量或延长加入CCK-8后的培养时间。 2.如果细胞数据出现异常增加，或者数据结果的方向相反等问题，可能是实验中产生了气泡、铺板不均匀等操作问题，请重复实验。

1.Yuan-Yuan Sun, Wen-Wu Bai et al. Period 2 is essential to maintain early endothelial progenitor cell function in vitro and angiogenesis after myocardial infarction in mice
Journal of Cellular and Molecular Medicine 2014, 3 （IF=4.753）
2.Meiying Li, Xuejun Yu et al. Bufalin exerts antitumor effects by inducing cell cycle arrest and triggering apoptosis in pancreatic cancer cells
Tumor Biology 2013, 11 （IF=2.518）
3.Ruiqiang Hang , Ming Zhang, Paul K. Chu et al. Biological response of endothelial cells to diamond-like carbon-coated NiTi alloy
Journal of Biomedical Materials Research 2012, Volume 100A, Issue 2, （IF=3.044）

4.Jun-Xi Wang, Ying-Yao Zhang et al. Role of Centromere Protein H and Ki67 inRelapse-free Survival of Patients after Primary Surgeryfor Hypopharyngeal Cancer
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention 2012, Volume 13, （IF=1.24）