WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

BB-4203
选择规格
  • 250T
  • 500T
  • 1000T
价格
  • ¥400元
  • ¥700元
  • ¥1150元
数量
产品概述 product description

贝博® BBcellProbe® WST-1细胞增殖检测试剂盒采用WST-1检测细胞活性、增殖、毒性等的试剂盒。可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测等。 WST-1是广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂。WST-1是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。 WST-1是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-1产生的formazan是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。WST-1产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。WST-1比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,线性范围更宽,灵敏度更高。 贝博® BBcellProbe® WST-1细胞增殖检测试剂盒使用时无须同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外步骤去溶解formazan。WST-1对细胞无明显毒性。加入WST-1显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到最佳测定时间。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.长期不用可以-20℃保存。
2.冻存后融解时注意重新混匀。
3.染色液避免反复冻融。
4.染色液需要长期保存时可以根据使用情况进行小量分装后-20℃保存。
5.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
酶标仪
适用样本
动物细胞
产品特点
1.使用方便:仅使用单一试剂;
2.结果稳定:试剂本身稳定性高,实验结果稳定可靠;
3.线性范围更宽,灵敏度更高。
产品应用
酶标仪
仪器准备
1.带有450nm滤光片的酶标仪 2. CO2培养箱
试剂准备
1.PBS 2.纯水
耗材准备
1.移液器及吸头 2.96孔培养板

使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发,为了减少误差,建议培养板的四边每孔只加培养基,而不作为指标检测孔。
3.有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。
4.若细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化或pH发生变化,建议更换新鲜的培养基后再加WST-1试剂。含有酚红的培养基可用于本试剂盒做细胞活性的测定。
5.如果不是使用96孔板检测,WST-1溶液的用量相应等比例增加即可。
使用方法
1. 加细胞悬液100ul(约5000-10000个细胞)到96孔板(边缘孔用无菌水或PBS填充)。每板设对照(加100l培养基)。
2. 置37℃,5% CO2孵育过夜,倒置显微镜下观察。
3. 每孔加入10 ul 待检测药物溶液, 37℃孵育。
4. 每孔加入10 ul WST-1溶液,37℃孵育1-4 小时。
5. 测定450 nm各孔的吸光值,如无450nm滤光片,可以使用430-480nm的滤光片。
6. 同时设置空白孔(培养基和WST-1溶液,无细胞),对照孔(不加药培养基和WST-1溶液,有细胞),每组设定3-5复孔。 结果分析 :
细胞活力计算:
将各测试孔的OD值减去空白孔OD值。各重复孔的OD值取平均数。
细胞活力% =(加药细胞OD-空白OD/对照细胞OD-空白OD)×100

常见问题分析
1、 每孔接种细胞数量多少?
标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量为1,000 个/孔 (100 μl 培养基)。预先在1,000-100,000个/孔范围内摸索条件。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入试剂。
2、 酚红和血清影响实验结果吗?
酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
参考文献
1.JingHu et al.
Silencing ZAP70 prevents HSP65-induced reverse cholesterol transport and NF-κB activation in T cells
Biomedicine & Pharmacotherapy Volume 102, June 2018, Pages 271-277

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