SRB细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

BB-4208
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产品概述 product description

贝博® BBcellProbe® SRB细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒是一种替代MTT法的细胞活性检测方法。 SRB可与生物大分子中的碱性氨基酸结合，在490nm~520nm波长处其OD值与活细胞数成良好的直线关系。在515nm的OD读数，可用做细胞数的定量。 SRB法比MTT法稳定性更高。SRB法可以用于悬浮细胞的检测。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度
2-8℃避光
注意事项
长期不用分装后-20℃避光保存，避免反复冻融。
有效期
一年
检测方法
酶标仪
适用样本
动物细胞
产品特点
1.稳定性高。
2.没有严格时间限制，固定后或SRB结合后的细胞均可存放，样品7天后测定的OD值下降不超过2％。
3.SRB法对于测定悬浮细胞无细胞损失，结果灵敏准确，重复性好。
产品应用
酶标仪
仪器准备
1.带有450nm滤光片的酶标仪 2. CO2培养箱
试剂准备
1.PBS 2.纯水
耗材准备
1.移液器及吸头 2.96孔培养板

使用注意事项
1.接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发，为了减少误差，建议培养板的四边每孔只加培养基，而不作为指标检测孔。
2.培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。
3.洗细胞时充满孔后保持一会倒掉即可，也可以用排枪或洗板机。
4.OD值在1-2之间较好。
使用方法
以下以96孔板100ul培养基培养细胞为例，如果用于其他方法培养的细胞，等比例调整试剂用量即可： 一、 试剂配制：
1X洗涤液D：根据样品数量，用纯水100倍稀释100X洗涤液D。
1X溶解液：根据样品数量，用纯水10倍稀释10X溶解液。

二、 细胞检测
1. 取出培养好待测的96孔板。
2. 在培养基表面小心加入50ul固定液（悬浮细胞加100ul固定液），静置5分钟后放入4℃冰箱30分钟-1小时。（注：贴壁细胞可弃培养基后加入用纯水3倍稀释的固定液；悬浮细胞必须直接在培养基上加入固定液，否则容易导致细胞损失。轻加在培养液面，静置5分钟后再将平板移至4℃放置1小时，可使悬浮细胞固定在培养孔底部）。
3. 弃固定液。
4. 每孔100ul洗涤液B洗一次，然后用纯水洗3-5次，室温晾干。
5. 加入100ul染色液，室温避光振荡染色15-20分钟。
6. 弃染色液。
7. 用1X洗涤液D洗3-5次，至未结合的剩余染色液洗净为止。室温干燥。
8. 加入100ul溶解液，室温避光振荡5分钟。
9. 酶标仪测定515nm或540nm吸光度。

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