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产品概述
product description
贝博BBcellProbe溶酶体活性检测试剂盒是利用BBcellProbeS系列探针进行溶酶体活性特异性染色的试剂盒。
本试剂盒中BBcellProbe®S58溶酶体染色探针为绿色荧光标记的溶酶体活性探针，具有498 nm/521nm的最大激发/发射波长。
BBcellProbe®S58溶酶体活性染色探针为荧光自抑制self-quenching）探针，本身的荧光极低，当进入溶酶体后，被溶酶体内的水解酶降解掉抑制基，释放出荧光基团发出明亮的绿色荧光。
保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.染料短期2周内可以2-8℃保存。染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需
要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固
在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完！
2.染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需
要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固
在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
荧光酶标仪/荧光分光光度计
适用样本
活细胞
产品应用
荧光酶标仪/荧光分光光度计
仪器准备
1.荧光酶标仪/荧光分光光度计
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光检测专用的黑色96孔板（必备）
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光检测专用的黑色96孔板（必备）
使用注意事项
1.除了目标模型样本，须根据实验需要合理设置阳性对照、阴性对照、空白对照等样本。
2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。
3.探针为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.荧光酶标仪检测必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。
3.探针为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.荧光酶标仪检测必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
使用方法
以下为简略步骤。最终的版本以试剂盒的纸质说明书为准。
1．染色工作液配制：
根据样本数量，用染料稀释液将S58荧光染料10倍稀释，再用HBSS缓冲液或者相应的无血清培养基100倍稀释，配制成染色工作液。
2.细胞染色
2.1对于贴壁细胞
1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37C预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30分钟~2小时（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。
3）利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37C预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30分钟~2小时（具体时间需根据细胞类型而定）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或加长染色时间。
3.观察结果：
在荧光显微镜（含合适滤片）下观察细胞。最大激发/发射波长为488/521nm。
溶酶体活性高的样本荧光强度高。
1．染色工作液配制：
根据样本数量，用染料稀释液将S58荧光染料10倍稀释，再用HBSS缓冲液或者相应的无血清培养基100倍稀释，配制成染色工作液。
2.细胞染色
2.1对于贴壁细胞
1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37C预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30分钟~2小时（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。
3）利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37C预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30分钟~2小时（具体时间需根据细胞类型而定）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或加长染色时间。
3.观察结果：
在荧光显微镜（含合适滤片）下观察细胞。最大激发/发射波长为488/521nm。
溶酶体活性高的样本荧光强度高。
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