2-8℃ 保存

1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.试剂拆封后请尽快使用完！

一年

丝状真菌

1.使用方便。
2.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒

1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒

1.离心管
2.吸头
3.一次性手套

1.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
2.如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
3.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
4.下游实验如果是进行特定蛋白酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。

电子版仅供参考，最终以试剂盒里的纸质说明书为准!

1. 提取液准备：
每200 μl提取液B中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
2. 取200-400 mg丝状真菌样本用PBS洗涤干净。
3. 加入500 μl-1 ml提取液A，用组织匀浆机/匀浆器充分匀浆。
4. 匀浆液在2-8℃振荡30分钟。
5. 将提取液在4℃下1000×g离心5分钟，移除上清，留沉淀。上清即为胞质蛋白。
6. 在沉淀中加入200 μl冷的提取液B，高速涡旋振荡5秒。
7. 在2-8℃振荡40分钟-1小时。
8. 在4℃，12000-14000×g条件下离心10分钟。
9. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。
10. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

蛋白浓度低？

处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。

Xiyan Zhang et al.
Adsorptive removal of aflatoxin B1 via spore protein from Aspergillus luchuensis YZ-1
Journal of Hazardous Materials 2024 （IF 14.224）

Yujie Li et al.
Cell detoxification of secondary metabolites by P4-ATPase-mediated vesicle transport
Elife 2023 （IF 8.713）

Xi Chen et al.
Transcription Factors BbPacC and Bbmsn2 Jointly Regulate Oosporein Production in Beauveria bassiana
Microbiology Spectrum 2022 （IF 9.043）

Wei Luo et al.
Multilevel Regulation of Carotenoid Synthesis by Light and Active Oxygen in Blakeslea trispora
Journal of Agricultural and Food Chemistry 2021 （IF 6.100）

Cao Yanyun et al.
Preliminary Study on Antifungal Mechanism of Aqueous Extract of Cnidium monnieri Against Trichophyton rubrum
Frontiers in Microbiology 2021 （IF 6.064）

Bing Li et al.
SWATH label-free proteomics analyses revealed the roles of oxidative stress and antioxidant defensing system in sclerotia formation of Polyporus umbellatus
Scientific Reports 2017 （IF 5.228）