蛋白定量

对大多数通过生化方法来提取、分离和分析蛋白的实验和工作流程而言,准确进行蛋白定量是非常关键的步骤。通常,蛋白定量方法的选择基于多个因素,包括与待分析样品缓冲液成分的兼容性。我们针对采用光谱仪和酶标仪进行比色法蛋白定量检测的应用,提供了各种检测试剂、试剂盒和标准品。

BCA、Bradford (Coomassie)、Lowry和其他定量试剂、试剂盒和定量标准品,可测定含不同缓冲成分的样品中的总蛋白浓度。

贝博® BBproExtra® BCA法蛋白定量试剂盒检测原理是,在碱性条件下,蛋白质将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA试剂相互作用,两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫颜色的络合物,该复合物为水溶性,其在562nm处有强吸光性,在一定浓度范围内,吸光度与蛋白质含量呈良好的线性关系。

通过测定562nm的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。

BCA法是目前实验室应用最广泛的蛋白质浓度测定方法,BCA 法快速灵敏、稳定可靠,对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小。

BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞蛋白提取过程中,常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。

本试剂盒采用牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准品溶液。

本试剂盒最小检测蛋白量可达0.2μg,检测浓度下限达到10μg/mL。

本试剂盒测定范围为20~2000 μg/ml,在此范围内有较好的线性。如需检测10ug/ml-200ug/ml的低浓度蛋白样品,可以选用贝博微量BCA蛋白定量试剂盒(相关产品BB-34012)。如需检测BCA法背景值较高而不适合BCA法的样品,可以选用贝博Bradford蛋白定量试剂盒(相关产品BB-3411)。