我们提供各种荧光染料和探针,包括钙、pH和膜电位指示剂。

细胞内钙离子的检测

钙离子检测试剂盒采用细胞内钙离子浓度荧光探针检测钙离子浓度水平的变化。

钙离子浓度变化是活细胞接受外界刺激后产生级联反应的重要信息传递方式,因此细胞内钙离子检测是信号转导G蛋白偶联受体(GPCR)介导的相关药物筛选以及其他相关实验中非常重要的一种研究手段。

F03具有极高的细胞渗透性,经过简单孵育即可实现细胞加载。穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成不易透过细胞膜的F03新产物,从而被滞留在细胞内。F03游离配体几乎是非荧光性的,其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。但是,当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,荧光会增加60至100倍,最大激发波长为 494nm,最大发射波长为 516nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右,发射波长为 515~530nm。可以使用荧光显微镜、酶标仪、激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

BB-48112  Ca2+钙离子检测试剂盒


细胞pH检测

细胞内pH(Intracellular pH,pHi)是酶活性和细胞功能的重要生理决定因素,所有蛋白质都依赖于严格调节的pH值以维持其结构和功能。质子 - 去质子化可以指示生物表面的电荷,并且是许多代谢反应中的组成部分。此外,跨线粒体膜的质子梯度用于产生细胞能量并支持其他线粒体过程。因此,细胞已经开发出多种机制来保持pHi的窄范围,以响应pH值的细胞内和细胞外波动。

贝博TM BBcellProbe® 细胞内pH值检测试剂盒采用BBcellProbe® P01细胞内pH值荧光探针检测胞内pH值的变化。BBcellProbeTM P01是pH敏感的荧光染料,其在碱性条件下荧光强更高,反之酸性条件下变低,从而BBcellProbeTM P01可被用于监测细胞内pH变化。

细胞内pH值检测试剂盒


线粒体膜电位的检测

贝博® BBcellProbe® 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)是利用JC-1探针检测线粒体膜电位变化的试剂盒,可以快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化,可以用于早期的细胞凋亡检测。

本试剂盒染料JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。与其他的阳离子染料如DiOC6(3)和罗丹明123相比,特异性更高,对线粒体膜电位变化的特异性高于质膜电位变化,对线粒体去极化检测的检测一致性更好;红绿色荧光强度比率只受线粒体膜电位的变化,不受线粒体大小,形状,密度的差异干扰;检测灵敏度强,对细胞应激反应的微小异质性都能辨别。

JC-1有单体和聚合体两种形式,两者的发射光谱不同。JC-1单体(J-monomer)的最大激发波长为514nm,最大发射波长为529nm;JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为585nm,最大发射波长为590nm。

JC-1可以透过细胞质膜进入细胞,以单体状态游离于胞质内,正常健康细胞的线粒体的膜电位较高,具有极性,JC-1 依赖于膜电位的极性被迅速摄入线粒体的基质内,并因浓度增高而在线粒体内形成多聚体,多聚体488nm激发时的最大发射波长为590nm,发射光为橙红色荧光,在流式图上表现为FL1和FL2双阳性;当细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,线粒体膜电位较低,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,从线粒体内释放到细胞质,此时JC-1为单体,488nm激发时最大发射波长为527nm,可以产生绿色荧光,形成流式图中细胞FL1为阳性。凋亡细胞则大多为FL1单阳性。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。

线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降,同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。