细胞活性检测概述

细胞活性是指样本中健康的活细胞数量。细胞活性检测用于测量细胞响应胞外刺激、化学试剂或疗法处理的物理和生理健康情况，或者用于确定细胞培养的最佳生长条件。

细胞活力选择指南

膜完整性活性染料（核酸染料）

膜完整性是细胞活性检测中的常用检测指标。膜完整性染料不会透过细胞，只能通过受损的细胞膜进入细胞。该染料不能穿透活细胞未受损的质膜。膜完整性活性染料包括：

PI 和 7-AAD

PI 和  7-AAD 是流式细胞仪常用的具有代表性的 DNA 结合染料；然而，两者也可用于荧光显微镜。

PI是一种核酸和染色质染料，常用于检测死细胞。在水溶液中，PI的激发/发射光谱为493/636 nm；但是结合DNA后，其荧光会提高20-30倍，激发/发射光谱值在535/617 nm。这种染料通常与凋亡检测染料（如annexin V）联合使用；更多信息见以下细胞活性检测试剂盒一节。加入 RNase 后，PI 还可用于固定细胞的 DNA 含量检测，进行细胞周期分析

7-AAD也是一种核酸和染色质染料，在结合DNA后发生光谱变化。它能选择性结合DNA的GC区域，显现出独特的带型，以进行染色体带型研究。7-AAD也能用于流式细胞周期分析中，适用于已固定和破膜的细胞。

膜完整性活性染料（氨基染料）

氨基反应性活性染料为非细胞通透性，并可与细胞的氨基蛋白发生反应。在活细胞中，这些染料与细胞外的伯胺结合，并发出微弱的荧光；在死细胞中，这些染料与细胞内的氨基蛋白结合，使得细胞荧光显著增强。由于染料是与细胞蛋白共价结合，样本可被固定和透化，而不会失去其活性染色模式。

酶活性底物

酶活性底物是一种不自发荧光的荧光试剂，可与活细胞中的细胞酶或受损细胞释放的细胞酶反应而发出荧光或显色。

Calcein AM 染料是细胞通透性底物，用于鉴别活细胞。这些底物可测量酶活性和膜完整性。活细胞的酶活性使酯酶能够切割 AM 基团，并产生荧光，而活细胞的完整细胞膜是细胞内保留荧光染料的必需条件。

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