微生物胞内pH值检测试剂盒（绿色荧光）

BB-48161
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产品概述 product description

贝博® BBcellProbe® 微生物细胞内pH值检测试剂盒采用BBcellProbe® P11胞内pH值荧光探针检测微生物胞内pH值的变化。BBcellProbe® P11是pH敏感的荧光染料，其在碱性条件下荧光强更高，反之酸性条件下变低，从而BBcellProbe® P11可被用于监测微生物胞内pH变化，见图一。 BBcellProbe® P11是一种可以穿透细胞膜的荧光染料，产生的荧光物质最大激发波长为 488 nm，最大发射波长为 528 nm，其在不同的pH值条件下发射的荧光强度不同，从而可以

保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
1.探针长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.探针A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期
6个月
检测方法
荧光酶标仪或光度计或流式细胞仪
适用样本
细菌
产品应用
荧光酶标仪或光度计或流式细胞仪
仪器准备
1.荧光酶标仪或光度计或流式细胞仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 2.HBSS 3. Nigericin sodium salt（相关产品BB-94002）（备选，如果需要绘制标准曲线定量测定）
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套,4.荧光检测专用黑色96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。 2.pH探针为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。 3.BBcellProbe® P11探针容易受潮，受潮后稳定性较差，注意干燥保存。 4.吸取BBcellProbe® P11探针母液时要用干燥的新吸头，不能使用含水的吸头。 5.未使用完的BBcellProbe® P11探针母液请拧紧螺旋盖，避免受潮失效。 6.BBcellProbe® P11探针工作液含水，配制后不可以长期保存，须现配现用。 7.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
使用方法
1. 染色工作液的配制： 根据样品数，用探针稀释液将P11探针进行10倍稀释， 然后再用HBSS缓冲液稀释 BBcellProbe® P11溶液20倍，配制成BBcellProbe® P11染色工作液。 2. 将 BBcellProbe® P11染色工作液加入已处理好的细胞，在37℃孵育60-120 分钟。 3. 用PBS洗涤细胞2-3次。用PBS重悬细胞。 4. 然后用该细胞进行荧光细胞内pH变化情况检测。 激发波长 488-506 nm，发射波长526-536 nm。 【注】：  荧光强度增加则细胞内pH值增加，荧光强度降低则细胞内pH值下降。  必须使用荧光检测专用黑色96孔板。
参考文献
1. Xingyue Bao et al. Ornithine decarboxylation (ODC) system of Shewanella baltica regulates putrescine production and acid resistance J Food Prot 2020 2. Weitao Su et al. Interaction between PHB2 and Enterovirus A71 VP1 Induces Autophagy and Affects EV-A71 Infection Viruses 2020 3. Tie Zhu et al. SNX11 Identified as an Essential Host Factor for SFTS Virus Infection by CRISPR Knockout Screening Virologica Sinica 2019

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