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产品概述
product description
细胞粘附是指细胞与细胞之间及细胞与细胞外基质之间的粘附，细胞粘附是细胞维持形态结构与功能的生物现象，是细胞间信息交流的一种形式。而信息交流的可溶递质称细胞粘附分子(cell adhesion molecule,CAM)。细胞粘附分子是参与细胞与细胞之间及细胞与细胞外基质之间相互作用的分子。 是一类独立的分子结构，是通过识别与其粘附的特异性受体而发生相互间的粘附现象。
细胞的生长、发育、分化及代谢状态和外界细胞因子、炎症介质反应等均可以影响细胞粘附，细胞粘附也可能是肿瘤细胞易发生浸润、转移等现象的分子基础
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
1.试剂A为无菌溶液，注意防止污染。
2.试剂B注意防潮；避免反复冻融。
3.染色液B 2-8℃避光保存，长期不用-20℃避光保存。
4.染色液B为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
5.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2.试剂B注意防潮；避免反复冻融。
3.染色液B 2-8℃避光保存，长期不用-20℃避光保存。
4.染色液B为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
5.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
有效期
1年
检测方法
1.荧光酶标仪 2.激光共聚焦
适用样本
动物贴壁细胞
产品特点
1.方便：可用荧光酶标仪、激光共聚焦、荧光显微镜检测；
2.快速：最快1小时内即可完成实验；
3.灵敏：数据可靠，重现性好，线性范围更宽；
4.准确：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠
2.快速：最快1小时内即可完成实验；
3.灵敏：数据可靠，重现性好，线性范围更宽；
4.准确：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠
产品应用
1.荧光酶标仪
2.激光共聚焦
2.激光共聚焦
仪器准备
1.荧光酶标仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液 或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光专用黑色96孔板
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光专用黑色96孔板
使用注意事项
1. 预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。
3. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小，重悬细胞是动作要轻柔，避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。
4. 染色培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入染色液B。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。
3. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小，重悬细胞是动作要轻柔，避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。
4. 染色培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入染色液B。
使用方法
包被：
1. 96孔板每孔加入100 μl包被液。
2. 将培养板置2-8°C过夜。
3. 移除包被液。
4. 干燥培养器皿。通风橱内吹风数分钟即可完成干燥，至肉眼观察完全干燥。
5. 用洗涤液洗涤1-3次。
细胞接种：
1. 待测定细胞处理好后，用胰酶消化，PBS洗涤，然后用相应培养基重悬，制成细胞悬液。
2. 按5×104细胞/孔接种96孔板，建议设3-5个复孔。同时设立对照组，即孵育后不弃上清组。
3. 放37℃培养箱孵育30分钟-1小时。
4. 取出培养板，吸弃培养基。
5. 然后用相应的无血清培养基或PBS洗涤2-3次。
6. 每孔加入100 μl新鲜无血清培养基。
粘附率检测：
1. 染色工作液的配制：
从冰箱中取出荧光染色试剂B，室温溶解后混匀。
根据样品数按下列比例配制染色工作液。
用37℃培养箱预热缓冲液（如HBSS）或无血清培养基将钙黄绿素荧光染料10-50倍稀释，配制成染色工作液。
2. 96孔板每孔加入10 μl细胞染色液B工作液，37℃避光孵育15-60分钟。
3. 加入100 μl HBSS或无血清培养基。
4. 用荧光酶标仪/激光共聚焦检测结果。最大激发波长488 nm，最大发射波长分别为520 nm。
5. 细胞粘附率计算。
将各测试孔的荧光强度值减去空白孔（未加细胞孔）荧光强度值。各重复孔的荧光强度值取平均数。
细胞粘附率% =（（F待测细胞 - F空白）/（F对照细胞 - F空白））×100
1. 96孔板每孔加入100 μl包被液。
2. 将培养板置2-8°C过夜。
3. 移除包被液。
4. 干燥培养器皿。通风橱内吹风数分钟即可完成干燥，至肉眼观察完全干燥。
5. 用洗涤液洗涤1-3次。
细胞接种：
1. 待测定细胞处理好后，用胰酶消化，PBS洗涤，然后用相应培养基重悬，制成细胞悬液。
2. 按5×104细胞/孔接种96孔板，建议设3-5个复孔。同时设立对照组，即孵育后不弃上清组。
3. 放37℃培养箱孵育30分钟-1小时。
4. 取出培养板，吸弃培养基。
5. 然后用相应的无血清培养基或PBS洗涤2-3次。
6. 每孔加入100 μl新鲜无血清培养基。
粘附率检测：
1. 染色工作液的配制：
从冰箱中取出荧光染色试剂B，室温溶解后混匀。
根据样品数按下列比例配制染色工作液。
用37℃培养箱预热缓冲液（如HBSS）或无血清培养基将钙黄绿素荧光染料10-50倍稀释，配制成染色工作液。
2. 96孔板每孔加入10 μl细胞染色液B工作液，37℃避光孵育15-60分钟。
3. 加入100 μl HBSS或无血清培养基。
4. 用荧光酶标仪/激光共聚焦检测结果。最大激发波长488 nm，最大发射波长分别为520 nm。
5. 细胞粘附率计算。
将各测试孔的荧光强度值减去空白孔（未加细胞孔）荧光强度值。各重复孔的荧光强度值取平均数。
细胞粘附率% =（（F待测细胞 - F空白）/（F对照细胞 - F空白））×100
参考文献
1.Guanghua Qin et al.
Hsa_circ_0032463 acts as the tumor promoter in osteosarcoma by regulating the miR‑330‑3p/PNN axis
International Journal of Molecular Medicine 2021
2.Jiong Lyu et al.
KLF7 is associated with poor prognosis and regulates migration and adhesion in tongue cancer
Oral diseases 2021
3.Huiqin Chen et al.
Repeated radon exposure induced lung injury and epithelial–mesenchymal transition through the PI3K/AKT/mTOR pathway in human bronchial epithelial cells and mice
Toxicology Letters 2020
4.Aihua Liu et al.
Down-regulation of NTSR3 inhibits growth, metastasis, and PI3K/AKT and MAPK signaling pathways in colorectal cancer cells
Biochemistry and Cell Biology 2020
5.Bo Tang et al.
Ionizing radiation induces epithelial mesenchymal transition in human bronchial epithelial cells
Bioscience Reports 2020
6.Bing Liu et al.
Protective effect of KLF15 on vascular endothelial dysfunction induced by TNF‑α
Molecular Medicine Reports 2018
Hsa_circ_0032463 acts as the tumor promoter in osteosarcoma by regulating the miR‑330‑3p/PNN axis
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2.Jiong Lyu et al.
KLF7 is associated with poor prognosis and regulates migration and adhesion in tongue cancer
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3.Huiqin Chen et al.
Repeated radon exposure induced lung injury and epithelial–mesenchymal transition through the PI3K/AKT/mTOR pathway in human bronchial epithelial cells and mice
Toxicology Letters 2020
4.Aihua Liu et al.
Down-regulation of NTSR3 inhibits growth, metastasis, and PI3K/AKT and MAPK signaling pathways in colorectal cancer cells
Biochemistry and Cell Biology 2020
5.Bo Tang et al.
Ionizing radiation induces epithelial mesenchymal transition in human bronchial epithelial cells
Bioscience Reports 2020
6.Bing Liu et al.
Protective effect of KLF15 on vascular endothelial dysfunction induced by TNF‑α
Molecular Medicine Reports 2018
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