细胞内pH（Intracellular pH，pHi）是酶活性和细胞功能的重要生理决定因素，所有蛋白质都依赖于严格调节的pH值以维持其结构和功能。质子 - 去质子化可以指示生物表面的电荷，并且是许多代谢反应中的组成部分。此外，跨线粒体膜的质子梯度用于产生细胞能量并支持其他线粒体过程。因此，细胞已经开发出多种机制来保持pHi的窄范围，以响应pH值的细胞内和细胞外波动。 贝博® BBcellProbe® 细胞内pH值检测试剂盒采用BBcellProbe® P01细胞内pH值荧光探针检测胞内pH值的变化。BBcellProbe® P01是pH敏感的荧光染料，其在碱性条件下荧光强更高，反之酸性条件下变低，从而BBcellProbe® P01可被用于监测细胞内pH变化，见图一。 BBcellProbe® P01是一种可以穿透细胞膜的荧光染料，BBcellProbe® P01本身没有荧光，穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成荧光物质，从而被滞留在细胞内。产生的荧光物质最大激发波长为 502nm，最大发射波长为 528nm，其在不同的pH值条件下发射的荧光强度不同，从而可以反映细胞内pH值得变化情况。 BBcellProbe® P01主要用于哺乳动物细胞的研究，也可用于其他动物组织、植物细胞、酵母等的细胞内pH水平检测。在有细胞内pH变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中也可应用。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为 525～540nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内pH值的变化。 本试剂盒内P01探针母液500-5000倍稀释后使用，一般1000-2000倍稀释使用即可，按每个样500ul计算，50ul母液至少可以做100-200个样品。 本试剂盒主要用于细胞内pH值变化的定性检测。但是在一定pH值范围内荧光强度与细胞内pH有良好的线性关系，据此可以用特定的pH值的标准缓冲液制备标准曲线，从而可以换算出细胞内的pH值的具体数据。如果需要制备标准曲线换算细胞内pH值数值，可以联系贝博技术邮箱bestbio@163.com索取参考方法。