全血活性氧检测试剂盒-红色荧光

BB-475011
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  • ¥2600元
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产品概述 product description

活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。 贝博® BBoxiProbe® 全血活性氧检测试剂盒是一种利用新型荧光探针BBoxiProbe® O13进行全血中活性氧检测的试剂盒。本试剂盒中的BBoxiProbe® O13 ROS探针为红色荧光的活性氧探针,具有536 / 610 nm的最大激发/发射波长。 贝博® BBoxiProbe® O13 ROS探针在全血中活性氧存在的条件下,被氧化生成红色荧光物质,红色荧光强度与全血内活性氧水平成正比,检测O13产物的荧光就可以知道全血内活性氧的水平。 在激发波长536 nm,发射波长610 nm附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、等检测O13产物荧光,从而测定全血内活性氧水平。 本试剂盒可以用于各种动物全血样本的检测。 本试剂盒只可以用于新鲜全血样本的活性氧检测,不可以用于长期冻存的全血样本的活性氧检测。 BBoxiProbe® O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针,贝博还可以提供绿色荧光的活性氧检测试剂盒。 贝博® 还可以为您提供各种细胞样本、组织、冰冻切片样本的活性氧、活性氮等各种颜色的检测试剂盒产品。 活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、一氧化氮(NO,Nitric oxide)、超氧阴离子(•O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)、ClO-和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。 活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果,在呼吸链中,在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应,在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧:“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2•-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B),同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C),生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D),在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH•(图1E),超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.避免反复冻融。
2.可以根据需要分装后冻存。
3.探针为DMSO溶液,在2-8℃时是固体状态,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期
6个月
检测方法
1.荧光分光光度计2.荧光酶标仪
适用样本
全血
产品特点
1.使用方便:可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。
仪器准备
1.荧光分光光度计或荧光酶标仪,
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
纯水或PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套 4.荧光专用黑色透明底96孔板

使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.O13染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。

使用方法

试剂准备:
根据样本数量,用纯水将O13探针10倍稀释。充分混匀,备用。

全血样本处理:
1. 在1 ml抗凝全血样本中加入100 μl全血处理剂B,充分混匀。
2. 在4℃条件下振荡15-20分钟。
3. 在4℃,10000×g条件下离心10分钟。
4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到制备好的待测全血样本。

样本检测:
1. 在96孔板中加入100微升上一步骤制备好的待测全血样品(已加试剂B,离心处理)、20微升O13探针,用移液器吹打,使之充分混匀。
2. 在37℃避光孵育15-30分钟。
3. 置于荧光光度计或酶标仪中,后于激发波长为535 nm、发射波长610 nm检测荧光强度。

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