

贝博® BBcellProbe® GOT检测试剂盒检测原理是GOT 催化 α-同戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定505nm 吸光度的变化,查标准曲线,即可计算GOT 酶活力。
GOT( 2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT 在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
该试剂盒可用于检测人体、动物的血浆、血清、尿液样品中GOT含量。
本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、信号传导、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬、细胞形态、生长、分化、迁移等数百种细胞检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞、组织染色,免疫组织化学,细胞培养等相关试剂盒产品。
2.比色杯
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.BCA 蛋白定量试剂盒
2.试管
3.吸头
4.一次性手套
2.ΔA 线性范围为:0.01 -2。
3.严重脂血、黄疸或溶血血清可能会引起测定管吸光度增加,因此,检测此类标本时,应该做血清标本对照管。
4.一般血清标本内源性酮酸很少,血清对照管吸光度值接近试剂空白管(以0.1m 纯水代替血清,其他和对照管同样操作)。所以,成批标本测定时,一般不需要每一标本都作本身血清对照管,以试剂空白管代替即可,但对超过正常的血清标本应进行复查,复查时,每份标本应作对照管。
5.当血清标本酶活力超过150卡门氏单位时,应将血清用生理盐水稀释5倍或10倍后进行测定。
6.加入试剂B溶液后,应充分混匀,使反应完全,加氢氧化钠溶液方法要一致,不同方法会导致吸光度读数的差异。
7..比色法中常用的有赖氏(Reitman-Frankel)法及金氏(King)法。赖氏法标准曲线所定单位数,是用实验方法和卡门氏分光光度法(速率法)作对比测定求得的。以卡门氏单位报告结果,比较准确。
8.卡门氏单位定义:1ml血清,反应液总容量3mL,340nm波长,1cm 光径,25℃,1min 内所生成的丙酮酸,使NADH氧化成 NAD*而引起吸光度每下降0.001为一个卡门氏单位。
9.血清中GOT 在室温(25℃)可保存2天,在0~4℃可保存一周,在-25℃可保存1个月。
10.1卡门氏单位=0.482 U/L(25℃)
1. 0.4mol/L氢氧化钠溶液的配制:
临用时用纯水将4mol/L氢氧化钠溶液10倍稀释,混匀即可;
现配现用,室温密封保存;
样品及试剂前处理
1. 准备样品:
血浆、血清按照常规方法制备,-20℃冻存。直接测定。
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议500 万细菌或细胞加入1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30 次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:9的比例,加入9倍体积的生理盐水,冰浴匀浆,制成10%的组织匀浆,2500转/分,离心10min,取上清,再用生理盐水10倍稀释成1%匀浆液,置冰上待测。
同时取部分上清液进行蛋白定量。
2. GOT检测
比色操作:
分光光度计预热30min 以上,调节波长至505nm,纯水调零。
按照下表加入试剂,设置对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,充分混匀,并注意避免产生气泡。
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