胆碱酯酶(ChE)检测试剂盒

BB-47454
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产品概述 product description

胆碱酯酶(cholinesterase，ChE)属于特异性酯酶，可分为两大类。一类是乙酰胆碱酯酶(Acetyl cholinesterase，EC 3.1.1.7, AChE)又称为真性胆碱酯酶，能水解乙酰胆碱，起到生理的调节作用；另一类为胆碱酯酶，又称假性胆碱酯酶(Pseudo cholinesterase， 3.1.1.8，PsChE)或拟胆碱酯酶，能水解胆碱的酯而不能水解乙酰胆碱酯。乙酰胆碱酯酶主要存在于神经元的胞质内、神经与肌肉接头处即所谓运动终板处；PsChE主要存在于血浆、胰腺、唾液腺内，生理功能尚不明确。测定胆碱酯酶可以判断有机磷中毒的程度，鉴定遗传性胆碱酯酶变异，肝实质性损害程度。 胆碱脂酶主要在肝细胞中产生,主要用于估计肝脏的储备能力和肝脏疾病的预后。肝脏疾病时活力常降低，降低程度往往与病情严重程度有关。肝硬化代偿期活力明显下降，在肝昏迷时最为显著，但在阻塞性黄疸时无改变。阿米巴肝脓肿此酶下降明显，治疗后在短期内迅速恢复正常，帮对阿米巴肝病研究有一定帮助。在一些肝外疾患，如全身营养不良，重度贫血、癌症、晚期血吸虫病、败血病、重症结核病（尤其是肾结核或浆膜结核）等均可中度或重度降低，此酶增高见于肾病综合症、甲状腺机能亢进、糖尿病、高血压、高血脂。 贝博® BBcellProbe® 胆碱酯酶(ChE)检测试剂盒（羟胺氯化铁比色法）其检测原理是待测样品中的胆碱酯酶能催化酶底物水解。剩余的酶底物与羟胺作用生成羟胺化合物，后者与三价铁离子结合生成呈棕色复合物，通过检测540nm处吸光度，即可测出ChE活力。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
微孔板，酶标仪
适用样本
血清、血浆、全血、细胞、组织
产品应用
微孔板，酶标仪
仪器准备
1.酶标仪
2.恒温箱
3.混匀器
4.移液器

试剂准备
1. 纯水
2. 生理盐水
3.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.吸头
2.微孔板
3.离心管
使用方法
一、试剂的前处理：
80umol/ml酶底物储备液的配制：
将1支酶底物粉剂B1倒入5ml稀释液B2中溶解，4℃保存。

8umol/ml酶底物工作液的配制：
按储备液：试剂A=1：9的比例进行稀释，现配现用。

试剂C工作液的配制：
临用前将粉剂C1倒入液体C2中，充分摇匀，根据使用量将刚配制好的混合液与C3等量混合，充分混匀，现配现用。

试剂F的配制：
临用前，将稀释液F2倒入粉剂F1中，充分混匀溶解后备用。

二、样本的前处理：
1. 血清（浆）：直接进行检测；
2. 组织样本：
准确称取样本的重量，按照重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，制成10%匀浆，2000g，离心10分钟，取上清待测。同时用BCA或考马斯亮蓝或双缩脲试剂测定组织蛋白浓度。
3. 全血样本：
轻轻颠倒肝素抗凝全血使其均匀后取0.1ml，再加入0.4ml冷纯水，充分混匀1分钟，静置15分钟，制备的5倍溶血液对光观察澄清透亮待测。

三、 血清（浆）、组织样本操作步骤：
在1.5ml离心管中按下表添加试剂进行反应：
【注】：
 37℃反应时可以水浴也可以置培养箱。

充分混匀，3000g 离心10分钟，吸取200ul上清加入96孔板。。
空白孔调零，波长520nm处测定各孔的吸光度值。

四、全血样本的操作表
【注】：
 37℃反应时可以水浴也可以置培养箱。

充分混匀，3000g 离心10分钟，吸取200ul上清加入96孔板。。
空白孔调零，波长520nm处测定各孔的吸光度值。

五、计算：
（一）血清样本计算：
1. 定义：
每毫升血清与底物在37℃作用20分钟，分解产生1umol酶底物为1个酶活力单位。
2. 计算公式：

血清中CHE活力 = 对照孔OD值-测定孔OD值 x 标准品浓度 x 1ml
（U/ml） 对照OD值 （8umol/ml） 取样量0.025ml

（二）组织样本计算：
1. 定义：
每毫克蛋白组织与底物在37℃作用20分钟，分解产生1umol酶底物为1个酶活力单位。
2. 计算公式：

组织中CHE活力 = 对照孔OD值-测定孔OD值 x 标准品浓度 x 1ml
（U/ mgprot） 对照OD值 （8umol/ml） 取样量0.025ml

÷ 待测样本的蛋白浓度
（mgprot/ml）
【注】：
 U/ mgprot为ChE活力单位/毫克蛋白

（三）全血样本计算：
1. 定义：
每毫升全血与底物在37℃作用20分钟，分解产生1umol酶底物为1个酶活力单位。
2. 计算公式：

全血中CHE活力 = 对照孔OD值-测定孔OD值 x 标准品浓度 x 1ml
（U/ml） 对照OD值 （8umol/ml） 取样量0.05ml

X 样本测试前的稀释倍数

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