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产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® α-淀粉酶(α-AMS)检测试剂盒其检测原理是还原糖还原 3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。β-淀粉酶不耐热，在 70℃钝化 15min，从而测定 α-淀粉酶活性。 淀粉酶(Amylase，AMS)又称1，4-α-D-葡聚糖水解酶，负责水解淀粉，包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
3个月
检测方法
分光光度计
适用样本
血清/血浆/组织
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.可见分光光度计
2.恒温水浴锅
3.离心机
4.移液器
5.玻璃比色皿
6.研钵
2.恒温水浴锅
3.离心机
4.移液器
5.玻璃比色皿
6.研钵
试剂准备
1.纯水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.试剂A若有黄色晶体析出，需 90℃加热溶解后再用；
2.试剂B若有沉淀析出，需 70℃加热溶解后再用。
2.试剂B若有沉淀析出，需 70℃加热溶解后再用。
使用方法
粗酶液提取：
组织：
称取 0.1~0.2g 样本（建议称取约 0.1g 样本），加 1 mL 蒸馏水匀浆；
将匀浆倒入离心管中，在室温下放置提取 15min，每隔 5min 振荡 1 次，使其充分提取；3000g，25℃离心10min，吸取上清液并且加蒸馏水定容至 10 mL，摇匀，即为淀粉酶原液。
血清（浆）：直接检测。
操作步骤和加样表（在 1.5mLEP 管中依次加入下列试剂）：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长到 540 nm，蒸馏水调零。
2、 试剂A或试剂B 40℃预热 10min
3、 测定步骤
混匀，95℃水浴 5min，冷却， 540nm 处读取对照管和样品吸光度，
计算 ΔA=A 样品管-A 对照管。
α-淀粉酶活性计算：
1、标准条件下测定回归曲线为 y=3.7215x -0.1778；
x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。
2、α-淀粉酶活性
（1）按照样本质量计算
单位定义：每 g 组织每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。
α- 淀 粉 酶 活 性 (mg/min/g 鲜 重 )
=[(ΔA ＋ 0.1778)÷3.7215×V 反 总 ]÷(W×V 样 ÷V 样总)÷T
=1.075×(ΔA＋0.1778)÷W
（2）按照蛋白质含量计算
单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)
= [(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷（V 样×Cpr）÷T
=0.1075× (ΔA＋0.1778) ÷Cpr
（3）血清（浆）样本中 α-淀粉酶活性计算
单位定义：每 mL 血清（浆）每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mL)
= [(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷V 样÷T
=0.1075×(ΔA＋0.1778)
V 反总：反应体系总体积，0.5mL；
V 样：加入反应体系中样本体积，0.25 mL；
V 样总：提取液总体积，10 mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g；
T：反应时间，5min。
组织：
称取 0.1~0.2g 样本（建议称取约 0.1g 样本），加 1 mL 蒸馏水匀浆；
将匀浆倒入离心管中，在室温下放置提取 15min，每隔 5min 振荡 1 次，使其充分提取；3000g，25℃离心10min，吸取上清液并且加蒸馏水定容至 10 mL，摇匀，即为淀粉酶原液。
血清（浆）：直接检测。
操作步骤和加样表（在 1.5mLEP 管中依次加入下列试剂）：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长到 540 nm，蒸馏水调零。
2、 试剂A或试剂B 40℃预热 10min
3、 测定步骤
混匀，95℃水浴 5min，冷却， 540nm 处读取对照管和样品吸光度，
计算 ΔA=A 样品管-A 对照管。
α-淀粉酶活性计算：
1、标准条件下测定回归曲线为 y=3.7215x -0.1778；
x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。
2、α-淀粉酶活性
（1）按照样本质量计算
单位定义：每 g 组织每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活力单位。
α- 淀 粉 酶 活 性 (mg/min/g 鲜 重 )
=[(ΔA ＋ 0.1778)÷3.7215×V 反 总 ]÷(W×V 样 ÷V 样总)÷T
=1.075×(ΔA＋0.1778)÷W
（2）按照蛋白质含量计算
单位定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)
= [(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷（V 样×Cpr）÷T
=0.1075× (ΔA＋0.1778) ÷Cpr
（3）血清（浆）样本中 α-淀粉酶活性计算
单位定义：每 mL 血清（浆）每分钟催化产生 1mg 还原糖定义为 1 个酶活性单位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mL)
= [(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V 反总]÷V 样÷T
=0.1075×(ΔA＋0.1778)
V 反总：反应体系总体积，0.5mL；
V 样：加入反应体系中样本体积，0.25 mL；
V 样总：提取液总体积，10 mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g；
T：反应时间，5min。
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