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产品概述
product description
抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP/TRACP）活性不被酒石酸抑制，而其他ACP受到酒石酸抑制。 贝博® BBcellProbe®抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测试剂盒利用上述原理，来测定TRACP 的活性。TRACP 酶催化底物水解，产生游离酚；酚与重氮盐反应生成有色偶氮化合物，在530nm处比色测定，通过计算可测出酶的活力。 本试剂盒测仅用于科研领域，不可用于临床诊断或其他用途。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
3个月
检测方法
分光光度计
适用样本
血清、血浆、组织
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.水浴锅
3.离心机
4.移液器
5.比色皿
2.水浴锅
3.离心机
4.移液器
5.比色皿
试剂准备
1.纯水
2.生理盐水
3.蛋白定量试剂盒
2.生理盐水
3.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.吸头
2.离心管
3.一次性手套
2.离心管
3.一次性手套
使用注意事项
1.试剂A若出现结晶，可在沸水浴中隔水加热溶解即可；
使用方法
试剂配制
1. 试剂B的配制：
使用时每支组分B1加一瓶稀释液B2配制成工作液B。
配好的试剂2-8℃保存一周有效；
2. 试剂C的配制：
使用时组分C1加一瓶稀释液C2配制成工作液C。
配好后的C工作液2-8℃避光；
样本处理
1. 血清（浆）样本：
血清（浆）直接加样。
2. 组织样本：
准确称取组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清液待测（即10%的匀浆上清液），同时用考马斯亮蓝蛋白定量试剂盒测定组织蛋白浓度。
定义及计算：
一、血清（浆）中TRACP的计算
1. 定义：1L血清在37℃与底物作用，1min产生1umol的游离酚为一个活力单位。
2. 计算公式：
TRACP活力（U/L）= 测定OD-对照OD × 1 ×反应液总体积
呈色物微摩尔消光系数 比色光径 x 反应时间 取样量
注：呈色物微摩尔消光系数为12.8 x 10-3L. umol-1.cm-1
3. 计算举例：
取血清按上表操作测得对照管OD值为0.019，测定管OD只为0.048，则计算如下：
TRACP活力 = 0.048-0.019 X 1 X2.45 = 7.391U/L
（U/L） 12.8X10-3 15 0.05
二、组织中TRACP的计算
1. 定义：每g组织蛋白37℃与底物作用，1min产生1umol的游离酚为一个活力单位。
2. 计算公式：
TRACP活力（U/gprot）= 测定OD-对照OD× 1 ×反应液总体积
呈色物微摩尔消光系数 比色光径 x 反应时间 取样量
÷ 待测样本蛋白浓度（g/L）
注：呈色物微摩尔消光系数为12.8 x 10-3L. umol-1.cm-1
3. 计算举例：
取小鼠后腿肌肉，制成10%匀浆，3500转/分，离心10分钟，取上清按操作表进行检测。测得对照管OD值为0.031，测定管OD值为0.128，同时测得蛋白含量为9.412gprot/L，则计算如下：
TRACP活力 = 0.128-0.031 X 1 X 2.45 ÷ 9.412 gprot/L=2.641 U/ g
（U/g） 12.8X10-3 15 0.05
1. 试剂B的配制：
使用时每支组分B1加一瓶稀释液B2配制成工作液B。
配好的试剂2-8℃保存一周有效；
2. 试剂C的配制：
使用时组分C1加一瓶稀释液C2配制成工作液C。
配好后的C工作液2-8℃避光；
样本处理
1. 血清（浆）样本：
血清（浆）直接加样。
2. 组织样本：
准确称取组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清液待测（即10%的匀浆上清液），同时用考马斯亮蓝蛋白定量试剂盒测定组织蛋白浓度。
定义及计算：
一、血清（浆）中TRACP的计算
1. 定义：1L血清在37℃与底物作用，1min产生1umol的游离酚为一个活力单位。
2. 计算公式：
TRACP活力（U/L）= 测定OD-对照OD × 1 ×反应液总体积
呈色物微摩尔消光系数 比色光径 x 反应时间 取样量
注：呈色物微摩尔消光系数为12.8 x 10-3L. umol-1.cm-1
3. 计算举例：
取血清按上表操作测得对照管OD值为0.019，测定管OD只为0.048，则计算如下：
TRACP活力 = 0.048-0.019 X 1 X2.45 = 7.391U/L
（U/L） 12.8X10-3 15 0.05
二、组织中TRACP的计算
1. 定义：每g组织蛋白37℃与底物作用，1min产生1umol的游离酚为一个活力单位。
2. 计算公式：
TRACP活力（U/gprot）= 测定OD-对照OD× 1 ×反应液总体积
呈色物微摩尔消光系数 比色光径 x 反应时间 取样量
÷ 待测样本蛋白浓度（g/L）
注：呈色物微摩尔消光系数为12.8 x 10-3L. umol-1.cm-1
3. 计算举例：
取小鼠后腿肌肉，制成10%匀浆，3500转/分，离心10分钟，取上清按操作表进行检测。测得对照管OD值为0.031，测定管OD值为0.128，同时测得蛋白含量为9.412gprot/L，则计算如下：
TRACP活力 = 0.128-0.031 X 1 X 2.45 ÷ 9.412 gprot/L=2.641 U/ g
（U/g） 12.8X10-3 15 0.05
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