产品概述
product description
维生素C在体内参与胶原物质合成,是脯氨酸羟化酶和赖氨酸羟化酶的辅因子,是催化多巴胺转变成去甲肾上腺素的铜酶多巴β羟化酶所必需,当维生素C缺乏时,合成的胶原得不到充分的羟化,不能很好的形成纤维。 维生素C最明显的化学活性是作为还原剂,它可以将Fe3+还原成Fe2+,促使铁在肠道吸收,促进铁的贮存和利用。抗坏血酸作为自由基清除剂,可以很快地与O-2、H2O2反应,更快地与OH-反应生成抗坏血酸自由基,它也可以清除O-2,因此,抗坏血酸可以保护机体免受内源性氧自由基的损伤。 维生素C能与-生育酚自由基还原成维生素E,间接地起着链阻断剂作用。 维生素C是血浆中最有效的抗氧化剂,是细胞外液抗氧化防御系统的第一道防线,Vc对血浆中正在进行着的脂质过氧化作用也有阻断作用。 贝博® 维生素C检测试剂盒利用维生素C能将Fe3+还原成Fe2+,Fe2+再与啡罗啉显色反应,可以测定样本中的维生素C的含量。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
血清、血浆、动物组织
产品特点
1. 快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2. 取样量微:本法取样本量约为150μl。
3. 稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
4. 再现性好:变异系数CV=1.7%。
5. 回收试验: X =103.3%。
6. 受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7. 测试面广:可测动物血清(浆)、动物组织等,效果均佳。
2. 取样量微:本法取样本量约为150μl。
3. 稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
4. 再现性好:变异系数CV=1.7%。
5. 回收试验: X =103.3%。
6. 受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7. 测试面广:可测动物血清(浆)、动物组织等,效果均佳。
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.比色皿
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.比色皿
试剂准备
1.纯水
2.冰醋酸
3.95%乙醇或无水乙醇
4.蛋白定量试剂盒(组织样本)
2.冰醋酸
3.95%乙醇或无水乙醇
4.蛋白定量试剂盒(组织样本)
耗材准备
1.吸头
2.一次性手套
3.离心管
2.一次性手套
3.离心管
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.维生素C标准品易氧化,因此,最好在样本上清液制备好后再配置标准溶液,并在10min内进行检测;
2.维生素C标准品易氧化,因此,最好在样本上清液制备好后再配置标准溶液,并在10min内进行检测;
使用方法
一、试剂配制:
1. 试剂A工作液的配制:
临用前按试剂A:纯水=1:14稀释,混匀备用;
2. 试剂B工作液的配制:
临用前将1支粉剂加0.36ml的冰醋酸再加纯水至40ml,溶解,4℃保存备用;
3. 试剂C工作液的配制:
因较难溶解,临用前2~4小时加95%乙醇或无水乙醇60ml充分溶解,4℃保存备用;
4. 试剂D工作液的配制:
临用前取0.15ml试剂D加纯水至25ml(需现配现用);
5. 600μg/ml Vc标准品工作液的配制:
将1支Vc标准品粉剂溶于10ml试剂A工作液,即可;
6. 6μg/ml Vc标准品工作液的配制:
取600μg/ml Vc标准品工作液再用试剂A工作液100倍稀释即可,需现配现用;
【注】:
维生素C标准品易氧化,因此,最好在样本上清液制备好后再配置标准溶液,并在10min内进行检测;
二、样本的前处理:
上清液的制备:取待测样本0.15ml加试剂A工作液0.45ml,漩涡混匀,放置15min后离心,3500~4000转/分,离心10min,上层清亮液体为上清液;
【注】:
组织样本处理:准确称取组织质量,用生理盐水为匀浆介质制备10%组织匀浆(脑组织制备成20%匀浆),每100mg组织加入900μl生理盐水,用匀浆器充分匀浆,1000g离心10分钟取上清,然后按上述步骤处理。
组织样本测定需要进行蛋白定量。
三、样本的测定:
充分混匀,静置10min,波长536nm,光径1cm(或0.5cm’),纯水调零,测定各管的吸光度值。
四、计算公式:
1、血清(浆)样本的计算公式:
Vc含量 = 样品OD值 - 空白OD值 x 标准浓度 x 样本前处理
(μg/ml) 标准OD值 - 空白OD值 (6μg/ml) 稀释倍数(4倍)
2、组织样本的计算公式:
Vc含量 = 样品OD值 - 空白OD值 x 标准浓度 x 样本测试前
(μg/mgprot)标准OD值 - 空白OD值 (6μg/ml) 稀释倍数(4倍)
÷待测匀浆蛋白浓度
(mgprot/ml)
1. 试剂A工作液的配制:
临用前按试剂A:纯水=1:14稀释,混匀备用;
2. 试剂B工作液的配制:
临用前将1支粉剂加0.36ml的冰醋酸再加纯水至40ml,溶解,4℃保存备用;
3. 试剂C工作液的配制:
因较难溶解,临用前2~4小时加95%乙醇或无水乙醇60ml充分溶解,4℃保存备用;
4. 试剂D工作液的配制:
临用前取0.15ml试剂D加纯水至25ml(需现配现用);
5. 600μg/ml Vc标准品工作液的配制:
将1支Vc标准品粉剂溶于10ml试剂A工作液,即可;
6. 6μg/ml Vc标准品工作液的配制:
取600μg/ml Vc标准品工作液再用试剂A工作液100倍稀释即可,需现配现用;
【注】:
维生素C标准品易氧化,因此,最好在样本上清液制备好后再配置标准溶液,并在10min内进行检测;
二、样本的前处理:
上清液的制备:取待测样本0.15ml加试剂A工作液0.45ml,漩涡混匀,放置15min后离心,3500~4000转/分,离心10min,上层清亮液体为上清液;
【注】:
组织样本处理:准确称取组织质量,用生理盐水为匀浆介质制备10%组织匀浆(脑组织制备成20%匀浆),每100mg组织加入900μl生理盐水,用匀浆器充分匀浆,1000g离心10分钟取上清,然后按上述步骤处理。
组织样本测定需要进行蛋白定量。
三、样本的测定:
充分混匀,静置10min,波长536nm,光径1cm(或0.5cm’),纯水调零,测定各管的吸光度值。
四、计算公式:
1、血清(浆)样本的计算公式:
Vc含量 = 样品OD值 - 空白OD值 x 标准浓度 x 样本前处理
(μg/ml) 标准OD值 - 空白OD值 (6μg/ml) 稀释倍数(4倍)
2、组织样本的计算公式:
Vc含量 = 样品OD值 - 空白OD值 x 标准浓度 x 样本测试前
(μg/mgprot)标准OD值 - 空白OD值 (6μg/ml) 稀释倍数(4倍)
÷待测匀浆蛋白浓度
(mgprot/ml)
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