2-8℃ 避光

开盖后组份按要求条件保存。

一年

微孔板，酶标仪

血清、血浆、尿液、细胞、组织

微孔板，酶标仪

1.离心机
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒

1.离心管
2.吸头

1. 试剂盒仅科研使用。
2. 样品含量如超出检测范围上限时，可用生理盐水稀释样本后进行测定，测定结果乘以稀释倍数。
3. 试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。
4. 试剂与样本量可按照全自动生化分析仪的要求，按照1:100的比例增减。

一、 样本处理：
1. 血清（浆）：直接检测，如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。
2. 培养液样本：吸取培养液，1000转/分，离心10min，取上清进行检测。
注：一般建议细胞密度在106个/ml以上。
3. 组织样本：
准确称量组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的匀浆介质，冰水浴下机械匀浆，2500转/分，离心10min，取上清进行检测。

注：A.如组织样本不存在高脂样本，匀浆介质统一用磷酸盐缓冲液（0.1mol/L pH7.4）或生理盐水进行提取；
B．如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本，匀浆介质统一用无水乙醇进行提取。
4. 细胞样本：
a、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，1000转/分，离心10min，弃上清，留细胞沉淀。
b、用等渗缓冲液（PBS或生理盐水）清洗1~2次，1000转/分，离心10min，弃上清，留细胞沉淀。
c、加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每次3~5s，间隔30s，重复3~5次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。
也可用裂解液裂解（TritonX-100，1-2%,裂解30-40分钟），裂解好的液体不可离心，待用。
注：破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。

使用方法：
酶标仪TG测定操作:
1、 下表依次加入试剂：
2、 充分混匀, 37℃水浴中孵育10分钟。
3、 酶标仪测定500~520nm吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。

计算：
血清、血浆等液体样本(空白调零)：
TG(mmol/L)=｛(样品管吸光度-空白管吸光度)/(标准管吸光度-空白管吸光度)｝×标准品浓度（2.26mmol/L）

细胞、组织等样本(空白调零)：
TG(mmol/gprot)=｛(样品管吸光度-空白管吸光度)/(标准管吸光度-空白管吸光度)｝×标准品浓度（2.26mmol/L）÷待测样本蛋白浓度(gprot/L)

备注：
 可根据使用仪器不同，等比例改变试剂与样本的量。
 样品含量如超出检测范围上限时，可用生理盐水稀释样本后进行测定，测定结果乘以稀释倍数。
 试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。
 试剂与样本量可按照全自动生化分析仪的要求，按照1:100的比例增减

参考值：
健康成年人理想范围：<1.7mmol/L(<150mg/dl)
边缘升高：<1.7~2.25mmol/L(150~199mg/dl)
升高：<2.26~5.64mmol/L(200~499mg/dl)
很高：≥565mmol/L(≥500mg/dl)

性能指标：
1. 空白管OD≤0.2（光径0.5cm）
2. 线性：0~9.04mmol/L范围内，r2＞0.995
3. 准确度: 相对偏差≤10%。
4. 灵敏度：检测2.26mmol/L样品管时，吸光度△A再0.2200~0.2900之间。
5. 测量精密度：批内<5%，批间<8%