2-8℃ 避光

开盖后组份按要求条件保存。

一年

分光光度计，比色

血清、血浆，尿液

微孔板，酶标仪

1.酶标仪
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒

1.蒸馏水

1.96孔板
2.吸头
3.一次性手套

1.由于本试剂盒为速率法，其全程反应时间为2~3min左右，其反应较快，因此测定的关键点在检测时间，一定注意操作时间，否则结果会显示不出差异。
2.该速率法线性范围可达2000μmol/L，血清样本的浓度过高时，应稀释后再测。
3.测定各孔时，各孔温度均需达到室温，否则影响结果。
4.轻度溶血样本对肌酐测定无影响。
5.一般尿液样品中肌酐含量较高，如果显色后吸光度仍超过本法的线性范围（即2000μmol/L），可用蒸馏水稀释10~100倍，再行重新检测。

样品及试剂前处理
1. 准备样品：
血浆、血清按照常规方法制备，-20℃冻存。
尿液中肌酐含量较高，应先用蒸馏水作1：10~100稀释后再测。
【注】：
 根据预实验结果调整稀释倍数。
 一般不建议稀释倍数过高，否则导致吸光度差值较小。
2. 配制标准品工作液：
取试剂A肌酐标准(10mmol/L)，按试剂A肌酐标准(10mmol/L)：试剂B肌酐标准稀释液=1:49的比例混合，使浓度达到200μmol/L，即为标准品工作液-肌酐标准(200μmol/L)。
配制好的标准品工作液4℃保存1周有效。
【注】：
 对于某些干扰物较多的样品，可以提高肌酐标准的工作浓度以减少误差，如配制浓度为300~400μmol/L的肌酐标准进行测定。
 如果调整了标准品浓度，后续计算公式中相应乘以300~400，而不是乘以200。
3. 配制肌酐显色工作液：
取试剂C肌酐显色液和试剂D肌酐检测缓冲液等量混合，室温放置20min，即为肌酐显色工作液。

肌酐的检测
1. 肌酐比色操作：
按照下表在96孔板中加入试剂，设置标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，充分混匀，并注意避免产生气泡。如果样品中的Cr浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
【注】：
 对于某些干扰物较多的样品，可以提高肌酐标准的工作浓度以减少误差，如配制浓度为300~400μmol/L的肌酐标准进行测定，如果调整了标准品浓度，后续计算公式中相应乘以300~400，而不是乘以200。
 一般先加标准、待测样品，加入肌酐显色工作液后应准确计时、读数。
2. 肌酐检测：
准确反应20s，酶标仪检测510nm吸光度，读取各孔吸光度(A标准1、A测定1)；待反应进行至准确60s，再读取各管吸光度(A标准2、A测定2)。
【注】：
 测定的关键点在检测时间，一定注意操作时间，否则结果会显示不出差异。

计算公式：
肌酐（μmol/L）=（A测定2 - A测定1）x N / (A标准2 - A标准1 ) x 200

公式中：A测定1为反应20s测定孔的吸光度；
A测定2为反应60s测定孔的吸光度；
A标准1为反应20s标准孔的吸光度；
A标准2为反应60s标准孔的吸光度；
N为样本稀释倍数。
参考区间：
成年人男性肌酐 62~115mmol/L(0.7-1.3mg/dl)
成年人女性肌酐 53~97mmol/L(0.6-1.1mg/dl)