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产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® 细胞葡萄糖检测试剂盒采用葡萄糖氧化酶法，根据Trinder反应原理1,2，葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOD)作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢(H2O2)；然后用过氧化物酶(POD)催化过氧化氢，使色原物质(4-氨基安替比林)生成醌亚胺，颜色的深浅与葡萄糖浓度成正比。 本试剂盒可以用于各种动物细胞样本的葡萄糖检测，不可以用于含有叶绿素的植物样本检测。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
酶标仪
适用样本
新鲜细胞
产品应用
酶标仪
仪器准备
1.酶标仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.生理盐水
3.蛋白定量试剂盒
2.生理盐水
3.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.还原性物质如尿酸、抗坏血酸、胆红质、谷胱甘肽可竞争消耗反应产生的过氧化氢，使测定结果偏低。
2.含强还原剂如二硫苏糖醇、巯基乙醇样品不建议使用本法。
3.当检验结果大于28mmol/L时，请用生理盐水稀释后再测定，结果乘以稀释倍数。
2.含强还原剂如二硫苏糖醇、巯基乙醇样品不建议使用本法。
3.当检验结果大于28mmol/L时，请用生理盐水稀释后再测定，结果乘以稀释倍数。
使用方法
一、样品处理
1. 收集1-5×107个细胞，在4℃，1000×g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞中加入200μl冷的裂解缓冲液，高速涡旋振荡15秒。
4. 用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
5. 将匀浆液置冰上持续振荡15-45分钟。
6. 在4℃，12000×g条件下离心15分钟。
7. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
8. 取上清进行蛋白定量。
计算：
葡萄糖浓度(mmol/g)
=（样品孔吸光度（A）/ 标准孔吸光度（A））x标准品浓度÷蛋白浓度
【注】：
此处以细胞样本蛋白浓度为例计算，葡萄糖浓度换算成mmol/g蛋白。
也可以按细胞数量进行计算，取固定数量的细胞进行匀浆处理，然后换算成mmol/104 cell即可。
产品性能指标：
1. 试剂空白吸光度：在510nm波长，试剂空白吸光度应不大于0.1；
2. 分析灵敏度：试剂测试5.55mmol/L的GLU样本时，吸光度变化差值（⊿A）为0.300~0.450；
3. 测定线性范围：0~25mmol/L，（1）线性相关系数r≥0.995；（2）线性偏差在0~2.5mmol/L的区间内，绝对偏差在-0.5mmol/L~0.5mmol/L范围内；在2.5mmol/L~25mmol/L的区间内，相对偏差在-15.0%~15.0%范围内；
4. 精密度：批内及批内瓶间差CV≦3.0%,批间相对极差≦4.0%。
5. 准确度：用国家标准品测定，实测值与标示值的偏差应在±15%范围内；。
1. 收集1-5×107个细胞，在4℃，1000×g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 在细胞中加入200μl冷的裂解缓冲液，高速涡旋振荡15秒。
4. 用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
5. 将匀浆液置冰上持续振荡15-45分钟。
6. 在4℃，12000×g条件下离心15分钟。
7. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
8. 取上清进行蛋白定量。
计算：
葡萄糖浓度(mmol/g)
=（样品孔吸光度（A）/ 标准孔吸光度（A））x标准品浓度÷蛋白浓度
【注】：
此处以细胞样本蛋白浓度为例计算，葡萄糖浓度换算成mmol/g蛋白。
也可以按细胞数量进行计算，取固定数量的细胞进行匀浆处理，然后换算成mmol/104 cell即可。
产品性能指标：
1. 试剂空白吸光度：在510nm波长，试剂空白吸光度应不大于0.1；
2. 分析灵敏度：试剂测试5.55mmol/L的GLU样本时，吸光度变化差值（⊿A）为0.300~0.450；
3. 测定线性范围：0~25mmol/L，（1）线性相关系数r≥0.995；（2）线性偏差在0~2.5mmol/L的区间内，绝对偏差在-0.5mmol/L~0.5mmol/L范围内；在2.5mmol/L~25mmol/L的区间内，相对偏差在-15.0%~15.0%范围内；
4. 精密度：批内及批内瓶间差CV≦3.0%,批间相对极差≦4.0%。
5. 准确度：用国家标准品测定，实测值与标示值的偏差应在±15%范围内；。
参考文献
1.Chengke Wang , Jiangyu Li et al.
Colorimetric method for glucose detection with enhanced signal intensity using ZnFe2O4–carbon nanotube–glucose oxidase composite material
Analyst 2019 （IF=3.864）
2.Shanshan Gao, Fangmin Li et al.
Effects and Molecular Mechanism of GST-Irisin on Lipolysis and Autocrine Function in 3T3-L1 Adipocytes
PLoS One 2016 （IF=2.766）
Colorimetric method for glucose detection with enhanced signal intensity using ZnFe2O4–carbon nanotube–glucose oxidase composite material
Analyst 2019 （IF=3.864）
2.Shanshan Gao, Fangmin Li et al.
Effects and Molecular Mechanism of GST-Irisin on Lipolysis and Autocrine Function in 3T3-L1 Adipocytes
PLoS One 2016 （IF=2.766）
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