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产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® 总巯基检测试剂盒是利用经典的Ellman法进行巯基检测的试剂盒。 本试剂盒准确性高，重复性和抗干扰性强，使用方便，可用于测定各种小麦粉样本。包括低筋粉、中筋粉、高筋粉等。 本试剂盒用于各种样品中的总游离巯基，如果需要测定总半胱氨酸巯基，可以选择贝博其它货号的试剂盒（相关产品：BB-47241）。 小麦粉自由巯基的含量直接影响小麦粉的加工品质，从而影响小麦粉的用途。研究表明，小麦粉和水的混合物在定向搅拌时，肽链间的二硫键(-S-S-)和次级键被打断，可与毗邻的肽链重新键合；部分游离的巯基会发生氧化，通过二硫键交联形成有序的纤维状大分子聚合体，使小麦面团的弹性逐渐形成。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
面粉
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰盒
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰盒
试剂准备
1.生理盐水
2.纯水
2.纯水
耗材准备
1.比色皿
2.试管
3.吸头
4.一次性手套
2.试管
3.吸头
4.一次性手套
使用注意事项
1.试剂B2干粉开盖使用前先敲入瓶底部，防止开盖时洒落导致损失。
使用方法
1. 试剂配制：
使用前，用超纯水将试剂A 2倍稀释，充分混匀，即配成试剂A工作液，置4℃备用。
使用前，准确吸取10ml试剂B1加入试剂B2干粉，充分溶解混匀，即成试剂B工作液（ELLMAN试剂），4℃避光保存。
2. 样本处理
准确称取2g待测定面粉样本，加入10ml试剂A工作液中，磁力搅拌提取10分钟。
3. 在7000g离心5分钟。取1ml上清待测。
4. 总巯基的测定
按下表在试管中加入试剂，同时做空白管（无样品液）、样品对照管（无ELLMAN试剂），空白管做一个即可，对照管每个样品均做。
充分混匀，置室温静置10分钟。412nm，0.5cm光径，测定各管OD值。
5. 计算
面粉中总巯基含量（mmol/g）
=（测定管吸光度-空白管吸光度-对照管吸光度）÷14.15÷0.5×1÷0.9÷200
【注】：
14.15为毫摩尔消光系数14.15/mM•cm；14.15 mM-1•cm-1
0.5为光径0.5cm；
1÷0.9为反应总体积/样品取样量
200为面粉含量（g/L）
使用前，用超纯水将试剂A 2倍稀释，充分混匀，即配成试剂A工作液，置4℃备用。
使用前，准确吸取10ml试剂B1加入试剂B2干粉，充分溶解混匀，即成试剂B工作液（ELLMAN试剂），4℃避光保存。
2. 样本处理
准确称取2g待测定面粉样本，加入10ml试剂A工作液中，磁力搅拌提取10分钟。
3. 在7000g离心5分钟。取1ml上清待测。
4. 总巯基的测定
按下表在试管中加入试剂，同时做空白管（无样品液）、样品对照管（无ELLMAN试剂），空白管做一个即可，对照管每个样品均做。
充分混匀，置室温静置10分钟。412nm，0.5cm光径，测定各管OD值。
5. 计算
面粉中总巯基含量（mmol/g）
=（测定管吸光度-空白管吸光度-对照管吸光度）÷14.15÷0.5×1÷0.9÷200
【注】：
14.15为毫摩尔消光系数14.15/mM•cm；14.15 mM-1•cm-1
0.5为光径0.5cm；
1÷0.9为反应总体积/样品取样量
200为面粉含量（g/L）
常见问题分析
1.巯基含量低于预期？
可能是样品中的游离巯基已经被氧化。
需要最大限度地减少样品制备与分析之间的时间间隔，尽快完成分析测定。可以在样品中加入1-5mM 的EDTA以螯合可能氧化巯基的二价金属离子。
可能是样品中的游离巯基已经被氧化。
需要最大限度地减少样品制备与分析之间的时间间隔，尽快完成分析测定。可以在样品中加入1-5mM 的EDTA以螯合可能氧化巯基的二价金属离子。
参考文献
1.Han-QuanWen De-FengXing et al.
Enhanced photo-fermentative hydrogen production by synergistic effects of formed biofilm and added L-cysteine
Renewable Energy 2019
2.Yan Yan, Xue-Qi Li et al.
Nanosized functional miRNA liposomes and application in the treatment of TNBC by silencing Slug gene
International Journal of Nanomedicine 2019
3.Sun, Meng-Ge; Shi, Ji-Feng et al.
Targeting Epirubicin Plus Quinacrine Liposomes Modified with DSPE-PEG2000-C(RGDfK) Conjugate for Eliminating Invasive Breast Cancer
Journal of Biomedical Nanotechnology 2015
Enhanced photo-fermentative hydrogen production by synergistic effects of formed biofilm and added L-cysteine
Renewable Energy 2019
2.Yan Yan, Xue-Qi Li et al.
Nanosized functional miRNA liposomes and application in the treatment of TNBC by silencing Slug gene
International Journal of Nanomedicine 2019
3.Sun, Meng-Ge; Shi, Ji-Feng et al.
Targeting Epirubicin Plus Quinacrine Liposomes Modified with DSPE-PEG2000-C(RGDfK) Conjugate for Eliminating Invasive Breast Cancer
Journal of Biomedical Nanotechnology 2015
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