蛋白质总巯基检测试剂盒

BB-472422
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  • 100T
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产品概述 product description

贝博® BBcellProbe® 总巯基检测试剂盒是利用经典的Ellman法进行总巯基检测的试剂盒。试剂盒准确性高，重复性和抗干扰性强，使用方便，可用于测各种蛋白质、抗体等液体样本。 本试剂盒用于测定蛋白质中的总游离巯基，如果需要测定总半胱氨酸巯基，可以选择贝博其它货号的试剂盒（相关产品：BB-472423）。 生物体内活性巯基（SH）主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。谷胱甘肽巯基能够修复氧化损伤的蛋白质，参与活性氧清除。蛋白质巯基主要存在于半胱氨酸，是蛋白质结构和生物体内某些氧化还原反应重要基团，在蛋白质结构中2个巯基脱氢而形成的双硫键，使相邻多肽得以连接．对于维持蛋白质完整结构作用十分重要。 巯基还是很多酶的活性基团，一些重金属盐如Hg2+等与酶巯基结合，影响酶活性。巯基化合物与机体许多机能活动，药物及毒物的作用以及某些疾病的发生发展有着密切关系。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
1.长期不用可以-20℃保存。
2.避免反复冻融。多次冻融会导致失效。
3.试剂拆封后请尽快使用完！
4.试剂A低温保存后可能会有结晶析出，可以置室温摇匀溶解或者37℃水浴溶解摇匀。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
蛋白质、抗体等
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒

试剂准备
1.生理盐水
2.纯水
3.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.比色皿
2.试管
3.吸头
4.一次性手套
使用注意事项
1.试剂A低温保存后可能会有结晶析出，可以置室温摇匀溶解或者37℃水浴溶解后摇匀再使用。
2.试剂B2干粉开盖使用前先敲入瓶底部，防止开盖时洒落导致损失。
使用方法
1. 试剂配制：
使用前，准确吸取10ml试剂B1加入试剂B2干粉，充分溶解混匀，即成试剂B工作液，4℃避光保存备用。

2. 样本处理
蛋白质/抗体等液体样本：直接检测或稀释后检测。

3. 总巯基的测定
按下表在试管中加入试剂，同时做空白管（无样品液）、样品对照管。
【注】：
 空白管做一个即可，对照管每个样品均要做。
充分混匀，置室温静置10分钟。412nm，0.5cm光径，测定各管OD值。
【注】：
 如果OD值太大，可以将样品用试剂A稀释后再检测。

4. 计算
总巯基含量（mmol/g）
=（测定管吸光度-空白管吸光度-对照管吸光度）÷14.15÷0.5×10÷蛋白含量（mg/ml）
【注】：
 以上以0.5cm光径检测设备为例，如果实际使用的检测设备是采用1cm光径，将计算公式中的0.5换成1即可。

【注】：
14.15mM/cm为毫摩尔消光系数；
0.5cm为光径；
10为反应总体积/样品取样量
常见问题分析
1.巯基含量低于预期？
可能是样品中的游离巯基已经被氧化。
需要最大限度地减少样品制备与分析之间的时间间隔，尽快完成分析测定。可以在样品中加入1-5mM 的EDTA以螯合可能氧化巯基的二价金属离子。
参考文献
1.Han-QuanWen, et al.
Enhanced photo-fermentative hydrogen production by synergistic effects of formed biofilm and added L-cysteine
Renewable Energy 2019

2.Yan Yan, et al.
Nanosized functional miRNA liposomes and application in the treatment of TNBC by silencing Slug gene
International Journal of Nanomedicine 2019

3.Guojie Wu, et al.
Preparation of Selenium-Enriched Yeast by Re-Using Discarded Saccharomyces cerevisiae from the Beer Industry for Se-Supplemented Fodder Applications
Applied Sciences 2019

4.Sun, Meng-Ge, et al.
Targeting Epirubicin Plus Quinacrine Liposomes Modified with DSPE-PEG2000-C(RGDfK) Conjugate for Eliminating Invasive Breast Cancer
Journal of Biomedical Nanotechnology 2015

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