肝糖原/肌糖原检测试剂盒

BB-4723
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产品概述 product description

贝博® BBcellProbe® 糖原检测试剂盒是利用糖原在浓硫酸的作用下可脱水生成糖醛衍生物，后者再与蒽酮作用形成蓝色化合物，与同法处理的标准葡萄糖溶液比色定量。糖原在浓碱溶液中非常稳定，故再显色之前先将组织放入浓碱中加热以破坏其他成分而保留糖原。 糖原是许多葡萄糖组成的多糖,它是机体细胞储存糖的形式.机体各组织都能利用葡萄糖合成糖原,其中肝脏和肌肉储存的糖原最多,分别称为肝糖原和肌糖原.糖原是糖主要的储存形式,进食后过多的糖可在肝脏和肌肉中合成糖元储存起来,以免血糖过高.肝糖元不仅可以由葡萄糖、果糖和半乳糖合成,还可以由甘油、乳糖和某些氨基酸等非糖类物质合成.肝糖原可调节器血糖浓度,当血糖升高时可在肝脏合成糖原,血糖降低度时,肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖.因此,肝糖原对维持血糖的相对恒定十分重要.肌糖原不能直接分解成血糖.当肌肉活动剧烈时,肌糖原分解成大量的乳酸,除一部分可氧化供能外,大部分随血液循环到肝脏,通过糖异生转化为肝糖原或血糖。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
3个月
检测方法
分光光度计
适用样本
细胞、组织
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.离心机
4.移液器
5.冰盒

试剂准备
1.蒸馏水
耗材准备
1.离心管
2.1ml玻璃比色皿
3.吸头
4.一次性手套

使用注意事项
1.样品处理和加样反应时可以用带盖的离心管或试管，也可以用普通试管加保鲜膜将口扎紧。
2.最低检测限为10ng/g鲜重或0.1ng/mg prot。
使用方法
试剂配制：
1. 试剂C工作液的配制：
在试剂C中倒入10ml蒸馏水，缓慢倒入40ml浓H2SO4，充分溶解混匀后使用，配制好的工作液2-8℃可保存一周；

样本前处理
1. 细胞或细菌：
A. 收集500-1000万细胞到离心管内，离心后弃上清；
B. 加入0.75ml试剂A提取液，超声波破碎细胞（功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；
C. 转移至10ml试管中，95℃水浴20min（盖紧，防止水分散失），隔5min挣摇试管1次，使其充分混匀；
D. 取出试管冷却后，用蒸馏水定容至5ml，混匀，8000g 25℃ 离心10min，取上清液待测

2. 组织样本：
A． 称取0.1~0.2g样品，加入0.75ml试剂A提取液，充分匀浆；
B． 移至10ml试管中，95℃水浴20min（盖紧，防止水分散失），隔5min挣摇试管1次，使其充分混匀；
C． 待组织全部溶解后，取出试管冷却后，用蒸馏水定容至5ml，混匀，8000g 25℃ 离心10min，取上清液待测
糖原计算
1. 按照样本质量计算
糖原（mg/g鲜重）=1.11X(C标准XV1)X(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(WXV1÷V2)
= 0.555 X (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W

2. 按照蛋白质含量计算
糖原（mg/mg prot）=1.11X(C标准XV1)X(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1XCpr)
= 0.111 X (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷Cpr

【注】：
1.11：为此法测得的葡萄糖含量换算成糖原含量的系数，即111ug糖原用蒽酮试剂显色的颜色相当于100ug葡萄糖用蒽酮试剂显色的颜色。
C标准管：标准管浓度，0.1mg/ml；
V1：加入反应体系中糖原提取液A的体积，0.25ml；
V2：加入提取液的体积，5ml；
Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；
W：样本鲜重，g。

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