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产品概述
product description
乳酸(Lactic acid，LD)又称2-羟基丙酸是一种化合物，是一种含有羟基的羧酸，分子式是C3H6O3，是糖无氧氧化（糖酵解）的代谢产物，产生于骨骼、肌肉、脑和红细胞，经肝脏代谢后由肾分泌排泄，参与生物化学很多反应过程。 贝博® BBcellProbe® 乳酸检测试剂盒以NAD为氢受体，LDH催化乳酸脱氢生成丙酮酸，使NAD转化为NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。 本试剂盒适用于检测血清、组织、发酵液、细胞、培养液等中的乳酸的含量。 本试剂盒不可以测定全血样本。需要测定全血样本可以需要贝博其它货号的试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
血清血浆、尿液、细胞、组织
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰盒
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰盒
试剂准备
1.生理盐水
2.纯水
3.蛋白定量试剂盒
2.纯水
3.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.试管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.血清、血浆、细胞、组织等样本应新鲜，或者于-80℃以下保存半年以内检测；
2.严重溶血及黄疸会使检测结果偏高；
3.在批量实验前需进行预实验，以确定测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05~0.35之间。如果测定绝对OD小于0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果测定绝对OD大于0.35，则需要将样本稀释后重新测定；
2.严重溶血及黄疸会使检测结果偏高；
3.在批量实验前需进行预实验，以确定测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05~0.35之间。如果测定绝对OD小于0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果测定绝对OD大于0.35，则需要将样本稀释后重新测定；
使用方法
试剂配制
1. 酶工作液的配制：
按试剂 A（酶稀释液）：试剂 B（酶储备液）=100：1配制，用多少配多少，配好后充分混合后待用，现用现配，24小时内有效。
2. 显色工作液的配制：
使用前将试剂D，1支倒入1瓶试剂C中，待粉末全部溶解后，充分混匀溶解，即为显色工作液。2~8℃避光保存2周内有效。
3. 样本的前处理
（1）血清、血浆、细胞培养液等样本：
取血清（浆）、培养液用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05~0.35之间的浓度为最佳取样浓度。
（2）细胞 / 组织样本：
10%匀浆液的制备：准确称取细胞沉淀湿重/组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例加入9 倍体积的生理盐水。冰水浴条件下机械匀浆，充分匀浆后，在2500×g，离心10min，取上清进行测定。
【注】：
大约100ul细胞沉淀，107个细胞。
取匀浆上清液用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05~0.35之间的浓度为最佳取样浓度。
计算公式：
血清/血浆/细胞培养上清中乳酸的计算公式：
血清中乳酸含量 = 测定管OD值-空白管OD值 X 标准品浓度 X 样品测试前
（mmol/L） 标准管OD值-空白管OD值 （3mmol/L） 稀释倍数
细胞/组织中乳酸的计算公式：
细胞/组织中乳酸含量 （mmol/gprot）
= 测定管OD值-空白管OD值 X 标准品浓度 ÷ 待测样品蛋白
标准管OD值-空白管OD值 （3mmol/L） 浓度（gprot/L）
1. 计算举例：
取5%小鼠肝脏组织匀浆0.02ml，按操作表进行乳酸测定，结果如下，测得空白管吸光度为0.076，标准管吸光度为0.384，测定管吸光度为0.357。同时测得5%匀浆上清蛋白浓度为7.006gprot/L。则计算结果为：
组织中乳酸含量 = 0.357-0.076 X 3 ÷ 7.006=0.391mmol/gprot
（mmol/gprot） 0.384-0.076
1. 酶工作液的配制：
按试剂 A（酶稀释液）：试剂 B（酶储备液）=100：1配制，用多少配多少，配好后充分混合后待用，现用现配，24小时内有效。
2. 显色工作液的配制：
使用前将试剂D，1支倒入1瓶试剂C中，待粉末全部溶解后，充分混匀溶解，即为显色工作液。2~8℃避光保存2周内有效。
3. 样本的前处理
（1）血清、血浆、细胞培养液等样本：
取血清（浆）、培养液用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05~0.35之间的浓度为最佳取样浓度。
（2）细胞 / 组织样本：
10%匀浆液的制备：准确称取细胞沉淀湿重/组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9的比例加入9 倍体积的生理盐水。冰水浴条件下机械匀浆，充分匀浆后，在2500×g，离心10min，取上清进行测定。
【注】：
大约100ul细胞沉淀，107个细胞。
取匀浆上清液用生理盐水稀释成不同浓度，按操作表做预实验，选择测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05~0.35之间的浓度为最佳取样浓度。
计算公式：
血清/血浆/细胞培养上清中乳酸的计算公式：
血清中乳酸含量 = 测定管OD值-空白管OD值 X 标准品浓度 X 样品测试前
（mmol/L） 标准管OD值-空白管OD值 （3mmol/L） 稀释倍数
细胞/组织中乳酸的计算公式：
细胞/组织中乳酸含量 （mmol/gprot）
= 测定管OD值-空白管OD值 X 标准品浓度 ÷ 待测样品蛋白
标准管OD值-空白管OD值 （3mmol/L） 浓度（gprot/L）
1. 计算举例：
取5%小鼠肝脏组织匀浆0.02ml，按操作表进行乳酸测定，结果如下，测得空白管吸光度为0.076，标准管吸光度为0.384，测定管吸光度为0.357。同时测得5%匀浆上清蛋白浓度为7.006gprot/L。则计算结果为：
组织中乳酸含量 = 0.357-0.076 X 3 ÷ 7.006=0.391mmol/gprot
（mmol/gprot） 0.384-0.076
常见问题分析
1.是否可以测定全血样本？
本试剂盒不可以测定全血样本。需要测定全血样本可以需要贝博其它货号的试剂盒产品BB-47222。
本试剂盒不可以测定全血样本。需要测定全血样本可以需要贝博其它货号的试剂盒产品BB-47222。
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