2-8℃避光

开盖后组份按要求条件保存。

6个月

分光光度计

血清、血浆、组织

1. 分光光度计
2. 恒温水浴锅
3. 涡旋混匀器
4. 离心机
5. 移液器
6. 冰箱
7. 冰盒

纯水

1.离心管
2.吸头
3.一次性手套

1. 测定血清和血浆时，如果样本不溶血，每批样本只需要随机挑选2个样本做空白或者用双蒸水代替样本做空白；如果样本溶血的话，必须每个样本做空白对照。
2. 测定全血时，必须每个样本都设定空白对照；
3. 测定组织匀浆时，如果样本不是高脂，每批样本只需随机挑选2个样本做空白或者用双蒸水代替样本做空白；如果样本高脂的话，必须每个样本做空白对照；
4. 所有实验用水均需使用纯水或双蒸水。
5. 需使用一次性塑料试管，若没有，使用较新的玻璃管并彻底洗刷干净。
6. 试剂D天冷后会凝固，待 37℃水浴变澄清时再使用。

一、血清（浆）操作表
1、 操作表：
充分混匀，蒸馏水调零，405nm，0.5cm光径，测各管吸光度值。

2、 CAT活力计算：

血清中CAT活力计算：

（1）单位定义：每毫升血清或血浆中每秒钟分解 1umol 过氧化氢的量为一个活力单位。

（2）计算公式：

血清（浆）CAT活力= （ 空白管OD值—测定管OD值）×271 × 1 x 样本测试前
（U/ml） 60× 取样量（ml） 稀释倍数

【注】：
 271为斜率的倒数。

二、全血的检测
1. 1:99溶血液的制备：取50ul全血加双蒸水至5ml充分混匀后静置10min，待测；
2. 操作表：
充分混匀，蒸馏水调零，405nm，0.5cm光径，测各管吸光度值。

3.血红蛋白中CAT活力计算：

（1）单位定义：每毫克血红蛋白每秒钟分解 1umol 过氧化氢的量为一个活力单位。
（2）计算公式：

溶血液中CAT活力= （ 空白管OD值+自身对照管OD值—测定管OD值）× 271× 1 ÷ 血红蛋白含量
（U/mg Hb） 60× 取样量 （mgHb/ml）

【注】：
 271为斜率的倒数。

三、组织样本的检测：
1. 组织匀浆液的制备：
准确称取组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9加入9倍体积的生理盐水，冰浴条件下，制备成10%的组织匀浆，2500转/分，离心10min；取上清，再用生理盐水稀释至最佳取样浓度，待测；（稀释浓度可摸索5%、2%、1%、0.5%、0.25%、0.125%）

2. 操作表：
充分混匀，蒸馏水调零，405nm，0.5cm光径，测各管吸光度值。

【注】：
 一般样本没有高脂等导致显著差异情况，空白管可换成双蒸水，做1~2管空白即可。
 如需做样本自身对照，则试剂盒测定样本数量减少至48样。

3. 组织中CAT活力计算：

（1）单位定义：每毫克组织蛋白每秒钟分解 1umol 过氧化氢的量为一个活力单位。
（2）计算公式：

组织匀浆中CAT活力= （ 空白管OD值—测定管OD值）× 271 × 1 ÷ 待测样本蛋白浓度
（U / mgprot） 60×取样量 （mgprot / ml）

【注】：
 271为斜率的倒数。