细菌活性氮(RNS)检测试剂盒-红色荧光

BB-462162
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产品概述 product description

活性氮(reactive nitrogen species,RNS)是指NO与包括活性氧在内的化合物相互作用,生成一系列包括ONOO•及其质子形式过氧亚硝酸(HOONO)等具有高度氧化活性的自由基和硝基类化合物,这些与活性氧相对应的以NO为中心的衍生物称为活性氮。活性氮主要包括氮氧化物一氧化氮(NO)和二氧化氮(NO2)、过氧化亚硝酰阴离子(ONOO•)、亚硝酰氢(HNO)、亚硝酸根离子(NO2-)和氨等。 贝博® BBoxiProbe® O09细菌活性氮(RNS)检测试剂盒是一种利用荧光探针BBoxiProbe® O09进行活性氮检测的试剂盒。O09探针可自由透过细菌细胞膜进入细胞内,并被细菌细胞内的RNS氧化,产生红色荧光物质,并稳定存在于细菌胞内。根据细菌细胞中红色荧光的产生和强弱,可以判断细菌细胞RNS含量的变化情况。 在激发波长516 nm,发射波长606 nm附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等可以检测荧光强度的设备,可以方便测定荧光情况,从而测定细菌胞内活性氮水平。 除了本红色荧光检测的试剂盒以外,贝博® 还可以提供绿色荧光的检测试剂盒(相关产品:BB-46216)以及细菌培养上清的活性氮检测试剂盒(相关产品:BB-475056)。 贝博® BBoxiProbe® 活性氮检测试剂具有高的灵敏度,良好的选择性,短的响应时间,以及可对检测对象在原位进行实时监控和观察等。更重要的是,这种检测技术对细胞内活性氮的内源性分布不产生巨大的外加干扰,从而能最大程度地得到内源性活性氮变化的真实信息。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.探针长期不用可以-20℃保存。
2.避免反复冻融。可以根据需要分装后冻存。
3.染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
4.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
5.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
6个月
检测方法
1.荧光分光光度计2.荧光酶标仪
适用样本
细菌
产品特点
1.使用方便:可用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。

仪器准备
1.荧光分光光度计/荧光酶标仪等
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.黑色96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
5.必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
使用方法
O09探针工作液配制:
1. 根据样本数量,用纯水将探针稀释液B进行10倍稀释。
2. 根据样本数量,用10倍稀释过的探针稀释液B将探针进行1000倍稀释。即配成染色工作液。

O09探针标记:
1. 准备1ml新鲜待测菌液。
2. 将待测细菌样本离心收集菌体。
3. 用PBS洗涤菌体2-3次。离心收集菌体沉淀。
4. 用500 μl-1ml染色工作液重悬菌体。
5. 在37℃避光孵育30分钟。
6. 孵育结束后,离心收集菌体。
7. 用PBS清洗细胞一次。离心收集菌体。
8. 用500 μl PBS重悬菌体。充分混匀。
9. 取200 μl加入荧光检测用96孔板。
10. 置于酶标仪中,后于激发波长为516 nm、发射波长606 nm检测荧光强度。

结果处理:
荧光强度强表示细菌活性氮强度高。
参考文献
1.Gang Zhong, et al.
Dopamine-melanin nanoparticles scavenge reactive oxygen and nitrogen species and activate autophagy for osteoarthritis therapy
Nanoscale 2019 (IF=7.233)

2.Yingjun Zhou, et al.
Respiratory exposure to nano‐TiO2 induces pulmonary toxicity in mice involving reactive free radical‐activated TGF‐β/Smad/p38MAPK/Wnt pathways
Journal of Biomedical Materials Research 2019 (IF=3.525)

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