切片一氧化氮检测试剂盒 （NO检测试剂盒）-绿色荧光

BB-46083
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产品概述 product description

贝博® BBoxiProbe® 切片一氧化氮检测试剂盒是一种利用荧光探针BBoxiProbe® O36进行一氧化氮检测的试剂盒。BBoxiProbe® O36是一种细胞膜通透性的荧光探针，被一氧化氮特异性氧化生成绿色荧光物质，绿色荧光强度与一氧化氮水平成正比，检测绿色荧光就可以知道组织内一氧化氮的水平。 在激发波长490 nm，发射波长516 nm附近，使用荧光显微镜/激光共聚焦检测绿色荧光，从而测定样本内一氧化氮水平。 贝博® BBoxiProbe® 一氧化氮检测试剂具有高的灵敏度，良好的选择性，短的响应时间，以及可对检测对象在原位进行实时监控和观察等。更重要的是，这种检测技术对细胞内一氧化氮的内源性分布不产生巨大的外加干扰，从而能最大程度地得到内源性一氧化氮变化的真实信息。 除了本试剂盒的绿色荧光一氧化氮检测产品，贝博还可以提供红色荧光的一氧化氮检测试剂盒。 贝博® BBoxiProbe® 可以提供针对各种类型活性氧、活性氮的检测试剂盒。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.避免反复冻融。
2.可以根据需要分装后冻存。
3.探针为DMSO溶液，在2-8℃时是固体状态，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期
6个月
检测方法
 荧光显微镜/激光共聚焦显微镜
适用样本
1.新鲜冰冻切片
2.振动切片
产品特点
1.使用方便：可用荧光显微镜直接观察；
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
仪器准备
1.荧光显微镜/激光共聚焦显微镜
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.黑色96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
3.对于某些样本，如果荧光太强，可以按照1:200-1:1000稀释探针。探针标记的时间也可以根据情况在20-60分钟内适当进行调整。
4.冰冻切片制作不需要经过固定脱水包埋等步骤，直接冷冻后切片贴片。
5.有条件也可以采用振动切片的方法。有些方便处理的样品类型也可以采用徒手切片。
6.以下操作步骤仅供参考，请根据实际样本情况调整。

使用方法
一、 试剂配制
1. 根据样本数，用纯水将BBoxiProbe® O36一氧化氮荧光探针100-200倍稀释，配成染色工作液。
2. 用纯水将10X清洗液10倍稀释，配成1X清洗液工作液。

二、 探针标记
1. 准备待测的厚为10 μm的未经固定处理的冰冻切片。
2. 室温下，小心加上200 μl清洗液工作液，铺满整个切片表面，静置3-5分钟。
3. 小心吸除清洗液。
4. 滴加100 μl染色工作液，在37℃培养箱避光孵育20-60分钟。
5. 移除染色液。
6. 用PBS洗涤切片2-3次。
7. 加盖玻片或甘油封片。
8. 荧光显微镜检测。
参考文献
1.Xiaohui Chen, et al.
Nitric oxide-induced stromal depletion for improved nanoparticle penetration in pancreatic cancer treatment
Biomaterials 2020 （IF=10.317）

2.Gang Zhong, et al.
Dopamine-melanin nanoparticles scavenge reactive oxygen and nitrogen species and activate autophagy for osteoarthritis therapy
Nanoscale 2019 （IF=7.233）

3.Yingjun Zhou, et al.
Respiratory exposure to nano‐TiO2 induces pulmonary toxicity in mice involving reactive free radical‐activated TGF‐β/Smad/p38MAPK/Wnt pathways
Journal of Biomedical Materials Research 2019 （IF=3.525）

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