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贝博® BBoxiProbe® 次氯酸根离子（ClO-）检测试剂盒是一种利用荧光探针BBoxiProbe® O88进行次氯酸根离子（ClO-）检测的试剂盒。O88探针本身荧光很弱，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，在次氯酸根离子（ClO-）存在的条件下，O88探针被氧化生成荧光物质O88F，O88F的红色荧光强度与细胞内次氯酸根离子（ClO-）水平成正比，检测O88F红色荧光就可以知道细胞内次氯酸根离子（ClO-）的水平。
在激发波长506 nm，发射波长606 nm附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测O88F 荧光，从而测定细胞内次氯酸根离子（ClO-）水平。
贝博® BBoxiProbe® O88荧光探针对次氯酸根离子（ClO-）有较高的选择性，但是也会与活性羟基反应。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的检测。
BBoxiProbe® O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针，贝博还可以提供绿色荧光的次氯酸根离子检测试剂盒。
贝博® BBoxiProbe® 可以为您提供各种细胞样本、切片样本、组织样本的活性氧、活性氮检测试剂盒产品。
贝博® BBoxiProbe® 可以为您提供总活性氧、总活性氮和各种亚型的活性氧/活性氮的检测试剂盒产品。
贝博® BBoxiProbe® 可以为您提供各种绿色、红色、蓝色、深红色的活性氧/活性氮检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞、组织染色，免疫组织化学，细胞培养等相关试剂盒产品。
2.探针液为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完！
2.荧光酶标仪
3.流式细胞仪
4.荧光显微镜
5.激光共聚焦
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
2.荧光酶标仪
3.流式细胞仪
4.荧光显微镜
5.激光共聚焦
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
或者HBSS
2.吸头
3.玻片
4.一次性手套
2.荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
3.探针标记完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的标记情况是否正常。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5.对于药物作用时间较短(小于2小时)的细胞，可以先标记探针，后用药物刺激细胞。对于药物作用时间较长(6小时以上)的细胞，先用相应的药物刺激细胞，后标记探针。
6.O88染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
7.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
8.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
9.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
10.酚红对O88荧光探针的检测有干扰，需避免。
11.染色后立即进行分析。
12.以下步骤仅做为参考，稀释比例和孵育时间可根据实际情况来调整。比如，对于某些细胞，如果发现未被刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可降低探针浓度。如果发现用感兴趣的药物刺激后荧光较弱，可升高O88探针浓度，以提高检测的灵敏度。另外，探针装载的时间也可以根据情况在15-60分钟内适当进行调整，孵育温度在4℃-37℃内调整。
根据样本数量，用HBSS将BBoxiProbe® O88荧光染料100-500倍稀释，配制成染色工作液。
2. 细胞探针标记
2.1 对于贴壁细胞，可以进行原位标记
1）培养皿/培养板准备细胞样本。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育20分钟～30分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）移除染色液，用PBS（pH7.4）洗涤细胞3次。
4）荧光显微镜（含合适滤片）或流式细胞仪、荧光酶标仪下观察。最大激发/发射波长为506 / 606 nm。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液100-200 μl重悬细胞，于生长状态下孵育20分钟～30分钟（具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）离心，吸除染色液，加入PBS（pH7.4）重悬细胞，洗涤3次。
4）流式细胞仪、荧光酶标仪检测。最大激发/发射波长为506 / 606 nm。
3．检测：
对于原位标记探针的样品可以用荧光显微镜，激光共聚焦显微镜直接观察，或收集细胞后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。对于收集细胞后标记探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测，用激光共聚焦显微镜直接观察亦可。
使用506 nm激发波长，606 nm发射波长，实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱。
次氯酸根离子（ClO-）浓度高则荧光强度强。
本试剂盒采用定性分析，通过设置参照样本，以参照样本的倍数来反映目标样本相对含量变化，这个“相对”是针对参照的。分析结果是定性的，也是没有单位的，因为它本质上是一个比值（目标/参照）。反映的是模型样本通过具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响其次氯酸根的变化，测定其是增加或者降低了。
2.荧光照片如何分析？
需要有相关的荧光强度分析软件。表达水平直接通过荧光信号的强弱和分布范围来体现。
有的显微镜扫描下来的图像本身就可以测面积和强度，可以同时测不同颜色的荧光强度。有的显微镜不支持此功能，可以将荧光染色彩色图像转换为黑白的灰度图，然后再以灰度值作为测量指标进行分析。
要结合明场的照片具体分析。如果细胞分布均匀可以算固定面积荧光强度。成像时中心和四周有差异时，一般将四周剪切掉也可以。如果细胞分布不匀，需要找到细胞分布匀称的视野，一个视野一个视野找。
如果要用图片做结果，就要平行做多个图片，作分析，统计，每张都要求荧光分布尽量一致。
为了去除杂光的影响，可以适当调节统计荧光的强度范围，将信号过弱的背景杂光去除掉。对照组和实验组整张图片需要做同样的处理，保证所有参数均要一致。
对于不同情况荧光强度的统计方法，根据实验需要或参考文献。可以算等面积的平均强度；也可以算阈值高于一定值的平均强度；也可以算荧光的累积而不算平均。要根据课题需要选择合适的测量统计方法。
3.荧光照片效果不好？
荧光拍照存在很多变量，每一个变量都会严重影响拍照效果。
荧光拍摄条件：拍摄环境、显微镜品牌和激发荧光决定了镜下观察的效果。同样的操作方法和切片，在不同品牌显微镜下显示出完全不同的荧光强度。
荧光衰减：荧光物质的衰减通常都是非常明显的。同样的一组切片，1小时内拍摄和8小时后拍摄，荧光效果完全不同。
最好用激光共聚焦显微镜，激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多，通常同一张片子激光共聚焦的效果明显更优。
4.背景荧光比较高？
在没有细胞外酯酶和其他氧化酶的情况下，荧光随时间的逐渐增加可能是来自自发水解，导致水解的原因可能与大气氧化或光诱导氧化有关。
荧光强度在变化？
可以观察到荧光的逐渐增加（由于自动氧化）或减少（由于细胞中的染料损失或光漂白）。在没有任何刺激或诱导的情况下，健康的未经处理的细胞中的荧光突发可以指示细胞死亡或一些其他氧化事件的进展。
注意检测时平行操作即可。
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