体液活性氧检测试剂盒(ROS)-绿色荧光

BB-460517
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产品概述 product description

贝博® BBoxiProbe® 体液活性氧检测试剂盒是一种利用新型荧光探针BBoxiProbe® O06进行体液中活性氧检测的试剂盒。本试剂盒中的BBoxiProbe® O06 ROS探针为绿色荧光的活性氧探针,具有488 / 520 nm的最大激发/发射波长。
贝博® BBoxiProbe® O06 ROS探针在体液中活性氧存在的条件下,被氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与体液内活性氧水平成正比,检测O06产物的荧光就可以知道体液内活性氧的水平。
在激发波长488 nm,发射波长520 nm附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪等检测O06产物荧光强度,从而测定体液内活性氧水平。
本试剂盒可以用于各种动物体液样本的检测。
一般最好使用新鲜体液样本检测活性氧,反映的是体液当时的活性氧状态。冻存的体液样本的ROS在长期冻存过程中会损失掉,有条件的话就使用新鲜样本,不建议使用冻存的体液样本。已经冻存的体液样本中残余的ROS也可以用本试剂盒检测。
BBoxiProbe® O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针,贝博还可以提供蓝色、红色、深红色荧光的体液活性氧检测试剂盒。

贝博® BBoxiProbe® 可以为您提供各种细胞样本、切片样本、组织样本的活性氧、活性氮检测试剂盒产品。
贝博® BBoxiProbe® 可以为您提供总活性氧、总活性氮和各种亚型的活性氧/活性氮的检测试剂盒产品。
贝博® BBoxiProbe® 可以为您提供各种绿色、红色、蓝色、深红色的活性氧/活性氮检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞、组织染色,免疫组织化学,细胞培养等相关试剂盒产品。

保存温度
-20℃ 避光保存。
注意事项
1.染料短期2周内可以2-8℃保存。染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.探针液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
6个月
检测方法
荧光分光光度计/荧光酶标仪
适用样本
体液
产品特点
1.使用方便:可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。
产品应用
荧光分光光度计/荧光酶标仪
仪器准备
1.荧光分光光度计或荧光酶标仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.纯水
2.PBS缓冲液
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光专用黑色96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.O06染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
5.酶标仪检测必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
使用方法
试剂准备:
根据样本数量,用纯水将O06探针10倍稀释,配制成探针工作液。充分混匀,备用。

样本检测:
1. 在96孔板中加入100微升新鲜体液样本、10微升O06探针工作液,用移液器吹打,使之充分混匀。
2. 在37℃避光孵育15-30分钟。
3. 置于荧光光度计或酶标仪中,后于激发波长为488 nm、发射波长520 nm检测荧光强度。
【注】:
 不同样本的活性氧差异较大,如果荧光强度太强,超过了仪器的检测范围,可以将体液稀释后再检测。一般稀释5-50倍。保证所有样本稀释倍数一致即可。
 荧光强度强则活性氧含量高。
 可以用实验中对照体液样本的荧光强度值为基准,待测模型组体液的荧光强度值占对照体液的百分比来比较活性氧程度差异。
常见问题分析
1.活性氧结果如何分析?
ROS是多种物质的统称,不像某一单一活性氧指标,无法检测其绝对的含量,只能通过设置参照样本,以参照样本的倍数来反映目标样本相对含量变化,这个“相对”是针对参照的。分析结果是定性的,也是没有单位的,因为它本质上是一个比值(目标/参照)。反映的是模型样本通过具体的干预措施(如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等)如何影响其ROS的变化,测定其ROS是增加或者降低了。

2.背景荧光比较高?
荧光随时间的逐渐增加可能是来自自发水解,导致水解的原因可能与大气氧化或光诱导氧化有关。

3.荧光强度在变化?
可以观察到荧光的逐渐增加(由于自动氧化)或减少(由于体液中酯酶和其他氧化酶作用或光漂白)。注意检测时平行操作即可。
参考文献
1.Yongjun Yang et al.
Acute exposure to gold nanoparticles aggravates lipopolysaccharide-induced liver injury by amplifying apoptosis via ROS-mediated macrophage-hepatocyte crosstalk
Journal of Nanobiotechnology 2022 (IF=10.435)

2.Ying Li et al.
Low-temperature plasma-jet-activated medium inhibited tumorigenesis of lung adenocarcinoma in a 3D in vitro culture model
Plasma Processes and Polymers 2021 (IF=3.877)