甲基绿-派络宁染色液

BB-44563
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  • 50ml
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  • ¥250元
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产品概述 product description

甲基绿-派洛宁染色液是一种把细胞核染成绿色或蓝绿色，把细胞浆和细胞核中的核仁染成红色或红紫色的染色液。 甲基绿又称为双绿SF，属于碱性染料，是具有金属光泽的绿色微结晶或粉末，分子量为608.78，分子式为C27H35Cl4N3Zn。甲基绿和细胞核中的DNA结合，从而使细胞核染成绿色或蓝绿色，派洛宁可以和细胞浆或核仁中的RNA结合，从而使细胞浆和核仁染成红色或红紫色。 贝博® BBcellProbe® 甲基绿-派洛宁染色液经过改良，不含甲醇，在组织或细胞染色中对细胞核进行染色，其中的甲基绿经过提纯，更容易着色。本染色液也可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。10ml染色液可以染色20个样本。 本试剂盒测仅用于科研领域，不可用于临床诊断或其他用途。

保存温度
室温避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
显微镜
适用样本
1. 石蜡切片
2. 冰冻切片
3. 细胞
仪器准备
1. 37℃恒温水浴锅
2. 显微镜
试剂准备
1. 纯水
2. 系列乙醇
3. 4%多聚甲醛
4. 丁三醇或丙酮或正戊醇
5. RNase（可选）
耗材准备
1. 一次性手套
2. 滤纸
使用注意事项
1. 首次使用染色液时建议先取1~2个样品做预实验；
2. 甲基绿-派洛宁染色液染色可以根据染色结果和要求调整时间；
3. 有些粘液细胞有可能被派洛宁染成红色，应注意区分。
使用方法

（一）石蜡切片染色
1. 组织入Carnoy固定液或10%中性福尔马林，固定3~5h；
2. 切片5um，常规脱蜡至水，纯水稍洗；
3. 入甲基绿-派洛宁染色液，室温浸染30~60min；
4. 取出切片，用滤纸稍微吸干切片周围的染色液；
5. 用丁三醇(也可用丙酮或者正戊醇)冲洗3次，每次2~3min；
6. 二甲苯透明，中性树胶封固。

（二）冰冻切片染色
1. 纯水冲洗2min；
2. 切片入甲基绿-派洛宁染色液，室温浸染25~50min；
3. 纯水冲洗2次，此时样本显蓝色；
4. 取出切片，用滤纸稍微吸干切片周围的染色液；
5. 用丁三醇(也可用丙酮或者正戊醇)冲洗3次，每次2~3min；
6. 二甲苯透明，中性树胶封固。

（三）细胞染色
1. 用4%多聚甲醛固定10min以上；
2. 纯水洗涤2min；
3. 换用新鲜的纯水，再洗涤2min；
4. 用甲基绿-派洛宁染色液染色5~10min；
5. 显微镜下观察。

（四）荧光染色
1. 如果进行免疫荧光染色，在染色后应70%乙醇洗涤2次，每次2min；
2. 95%乙醇脱水2min；
3. PBS或生理盐水或TBS等用于免疫荧光染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min；
4. 进行免疫荧光染色 或其他荧光染料的染色。


染色结果：

细胞核（DNA）： 绿色或蓝绿色；
细胞浆和核仁（RNA）：红色或红紫色。


阳性对照：
1. 取另外一张连续切片入RNase（1mg/ml），37℃恒温箱内孵育3h，纯水冲洗干净；
2. 入甲基绿-派洛宁染色液染色，余下步骤同上。RNA染色结果阴性。

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