草酸铵结晶紫染色液

BB-44560
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  • 100ml
价格
  • ¥150元
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产品概述 product description

草酸铵结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分，主要由草酸铵、结晶紫、乙醇等组成。革兰阳性菌染色中，细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理，形成不溶性复合物，该复合物不能通过细胞壁，不易被脱色，所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。

保存温度
室温避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
显微镜
适用样本
细菌
仪器准备
显微镜
耗材准备
1. 玻片
2. 染缸
使用注意事项
1. 涂片之前，应事先在背面做好圆圈标记，以便判断后续试验的位置。
2. 标本涂片不能太厚。较厚的涂片应延长脱色时间。
3. 取细菌时，应注意自我防护，拔或塞试管塞时，应将试管口通过火焰略加烧灼，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
4. 加热固定涂片时，应注意玻片勿太靠近火焰，一般要求玻片温度不超过60℃，以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。
5. 革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度，脱色时间应根据经验判断。脱色过度，阳性菌可被误染为阴性菌；脱色不够，阴性菌可被误染为阳性菌。
6. 脱色剂脱色是革兰氏染色的重要步骤，如脱色过度则阳性菌误染成阴性菌，如脱色不够，则阴性菌误染成阳性菌，脱色时间要掌握好。
7. 在实验中如果出现假阳性和假阴性的结果，假阳性主要是由于脱色不完全，可能是由于涂片过厚，或者是结晶紫染色过度，导致脱色不完全。假阴性可能是因为细胞固定过度，造成细胞壁通透性的改变，而出现假阴性结果；另外，细胞培养时间太长，可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶，也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果。
8. 待检细菌培养时间会影响染色，阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解，常呈阴性。
使用方法
按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。

1、涂片：
　　液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，再用接种环取少量菌体，涂在载玻片上，使其薄而均匀。
2、 晾干：让涂片在空气中自然干燥。
　　3、 固定：让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。
　　4、 染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加初染液，染1min。
　　5、 水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
　　6、 媒染：滴加1滴媒染液，染1min，水洗。
　　7、 脱色：吸去残留水，滴加脱色液脱色20-30s，将玻片不停摇动，至流出液无紫色，立即水洗。
8、 复染：滴加复染液复染3-5min，水洗。
9、 结果观察。

结果分析：
革兰氏阳性菌都呈蓝紫色，革兰氏阴性菌都呈红色

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