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产品概述
product description
贝博TM BBcellProbeTM 甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,0.5%,硼酸盐法)采用强碱性硼酸盐缓冲液体系，更利于组织细胞的着色。 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
保存温度
室温避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
显微镜
适用样本
1.肥大细胞 2.软骨 3.细胞涂片
仪器准备
显微镜
试剂准备
1. 甲醛钙固定液，或者采用10%中性福尔马林或福尔马林。
2. 蒸馏水
3. 系列乙醇
2. 蒸馏水
3. 系列乙醇
耗材准备
1. 玻片2. 染缸
使用注意事项
1. 针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
2. 以下步骤仅供参考，以实际样本情况和预实验染色情况进行优化调整。或者参考文献方法。
2. 以下步骤仅供参考，以实际样本情况和预实验染色情况进行优化调整。或者参考文献方法。
使用方法
一、肥大细胞染色
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液5~30min。
3. 蒸馏水或去离子水轻轻冲洗3~5min。
4. （可选）0.5%冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5. 快速95%和无水乙醇脱水。
6. 二甲苯透明，封固。
染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
二、软骨染色
1. 石蜡切片入二甲苯2次，每次15min。
2. 系列乙醇各1min。
3. 自来水洗2min。
4. 入甲苯胺蓝染色液，浸染10~15min。
5. 自来水洗2min，滤纸吸干水分。
6. 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7. 逐级乙醇脱水。
8. 二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
三、细胞涂片染色
1. 用20%乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释到0.1%即可。
2. 细胞涂片后，立即放入95%乙醇中固定15s，取出放在纸巾上。
3. 滴加1-2滴稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。
4. 10-15s后将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。
5. 无需干燥，直接镜检。
染色结果：
细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；
核仁呈紫红色；
红细胞呈橘红；
细胞质、单核细胞呈淡蓝色。
四、原位杂交染色
1. 用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:100。
2. 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。
3. 在蒸馏水或去离子水浸泡数次。
4. 按需求进行压片固定。
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液5~30min。
3. 蒸馏水或去离子水轻轻冲洗3~5min。
4. （可选）0.5%冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5. 快速95%和无水乙醇脱水。
6. 二甲苯透明，封固。
染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
二、软骨染色
1. 石蜡切片入二甲苯2次，每次15min。
2. 系列乙醇各1min。
3. 自来水洗2min。
4. 入甲苯胺蓝染色液，浸染10~15min。
5. 自来水洗2min，滤纸吸干水分。
6. 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7. 逐级乙醇脱水。
8. 二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
三、细胞涂片染色
1. 用20%乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释到0.1%即可。
2. 细胞涂片后，立即放入95%乙醇中固定15s，取出放在纸巾上。
3. 滴加1-2滴稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。
4. 10-15s后将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。
5. 无需干燥，直接镜检。
染色结果：
细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；
核仁呈紫红色；
红细胞呈橘红；
细胞质、单核细胞呈淡蓝色。
四、原位杂交染色
1. 用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:100。
2. 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。
3. 在蒸馏水或去离子水浸泡数次。
4. 按需求进行压片固定。
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