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产品概述
product description
贝博TM BBcellProbe® 改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理是嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织与骨组织区分开。 软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。 番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系，间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析，固绿与胶原纤维结合，不宜褪色，番红O-固绿染色的分化很关键，分化过度易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色过深。
保存温度
室温避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
显微镜
仪器准备
显微镜
试剂准备
1. 10%福尔马林固定液
2. 脱钙液
3. 系列乙醇
4. 蒸馏水
2. 脱钙液
3. 系列乙醇
4. 蒸馏水
耗材准备
1. 玻片2. 染缸
使用注意事项
1. 需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。
2. Weigert染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h后失去染色力。
3. 切片在番红O染色液中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4. 切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。
5. Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。
6. 95%乙醇脱水时间不宜过长。
2. Weigert染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h后失去染色力。
3. 切片在番红O染色液中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4. 切片分化时间应恰当，以背景呈绿色为宜。
5. Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。
6. 95%乙醇脱水时间不宜过长。
使用方法
染色工作液配制：
取染色液A1、A2等量混合即为Weigert染色液工作液。
【注】：
Weigert染色液现配现用。
24h后失去染色力，不宜预先配制。
1. 标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2. 常规脱蜡至水。
3. 入新鲜配制的Weigert染液工作液染色3～5min。
4. 酸性乙醇分化液分化15s。
5. 蒸馏水洗1min。
6. 入固绿染色液内浸染1.5～3min，蒸馏水洗1min。
7. 入番红O染色液内浸染2～5min，蒸馏水洗1min。
8. 用乙酸溶液洗涤切片1～2min，以便去除残留的固绿，蒸馏水洗1min。
9. 分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
10. 二甲苯透明，光学树脂封固。
染色结果：
软骨基质 深红色
软骨细胞核 蓝色
细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织 灰绿色
软骨细胞浆 红色
细胞核 灰黑色
取染色液A1、A2等量混合即为Weigert染色液工作液。
【注】：
Weigert染色液现配现用。
24h后失去染色力，不宜预先配制。
1. 标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2. 常规脱蜡至水。
3. 入新鲜配制的Weigert染液工作液染色3～5min。
4. 酸性乙醇分化液分化15s。
5. 蒸馏水洗1min。
6. 入固绿染色液内浸染1.5～3min，蒸馏水洗1min。
7. 入番红O染色液内浸染2～5min，蒸馏水洗1min。
8. 用乙酸溶液洗涤切片1～2min，以便去除残留的固绿，蒸馏水洗1min。
9. 分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
10. 二甲苯透明，光学树脂封固。
染色结果：
软骨基质 深红色
软骨细胞核 蓝色
细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织 灰绿色
软骨细胞浆 红色
细胞核 灰黑色
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