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产品概述
product description
贝博TM BBcellProbeTM ATPase染色(钙钴法)试剂盒是利用三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷为二磷腺苷和磷酸，磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀，再依次被置换为磷酸钴和硫化钴，最终产物为黑色硫化钴沉淀。
三磷酸腺苷酶( adenosine triphosphatase，ATPase)是一种水解酶，是催化ATP合成的一种酶。三磷酸腺苷酶根据所用激活剂、抑制剂以及酶定位的不同分为膜性三磷酸腺苷酶、肌球蛋白三磷酸腺苷酶、线粒体三磷酸腺苷酶等。ATPase能水解三磷酸腺苷为磷酸腺苷和磷酸，此酶只作用于磷酸与磷酸之间的高能键，因而释放大量能量。
保存温度
2-8℃
注意事项
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
有效期
6个月
适用样本
冰冻切片
仪器准备
1. 恒温箱
试剂准备
1. 中性福尔马林固定液
2. 蒸馏水
2. 蒸馏水
耗材准备
1. 玻片2. 染缸
使用注意事项
1. ATP孵育液、硫化液易失效，最好分成小分储存，一经开启立即使用。
2. 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。
3. 对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
4. 以下步骤仅供参考，以实际样本和预实验情况进行调整，或者参考文献。
2. 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。
3. 对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
4. 以下步骤仅供参考，以实际样本和预实验情况进行调整，或者参考文献。
使用方法
冰冻切片：
1. 冰冻切片直接入蒸馏水。
2. 入钙盐溶液中37℃温箱5min。
3. 入ATPase孵育液孵育40min，蒸馏水洗1min。
4. 入硝酸钴溶液孵育5min，入蒸馏水。
5. 入中性福尔马林室温固定2min，流水冲洗2min。
6. 在上述过程中配制硫化工作液，即取试剂(E)用蒸馏水稀释50倍, 即为硫化工作液，即配即用。
7. 切片入硫化工作液，孵育2min。
8. 流水洗10min后，入蒸馏水。
9. 甘油明胶封固。
染色结果：
酶所在阳性部位 黑色或棕黑色沉淀
阴性对照(可选做)：
1. 取对照切片，用试剂F-ATPase对照液进行孵育，并与用ATPase孵育液孵育的切片进行比较。两者反应相同部位可能有非特异性磷酸(单酯)酶存在，两者不同部位才是ATP酶活性所在。
2. 将切片入80℃蒸馏水10min，再与其他组织切片同时孵育，结果应为阴性。
1. 冰冻切片直接入蒸馏水。
2. 入钙盐溶液中37℃温箱5min。
3. 入ATPase孵育液孵育40min，蒸馏水洗1min。
4. 入硝酸钴溶液孵育5min，入蒸馏水。
5. 入中性福尔马林室温固定2min，流水冲洗2min。
6. 在上述过程中配制硫化工作液，即取试剂(E)用蒸馏水稀释50倍, 即为硫化工作液，即配即用。
7. 切片入硫化工作液，孵育2min。
8. 流水洗10min后，入蒸馏水。
9. 甘油明胶封固。
染色结果：
酶所在阳性部位 黑色或棕黑色沉淀
阴性对照(可选做)：
1. 取对照切片，用试剂F-ATPase对照液进行孵育，并与用ATPase孵育液孵育的切片进行比较。两者反应相同部位可能有非特异性磷酸(单酯)酶存在，两者不同部位才是ATP酶活性所在。
2. 将切片入80℃蒸馏水10min，再与其他组织切片同时孵育，结果应为阴性。
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