bestbio@163.com
服务热线：021-33921235
登录
说明书下载
产品概述
product description
贝博TM BBcellProbe® ATPase染色(钙钴法)试剂盒是利用三磷酸腺苷酶水解三磷酸腺苷为二磷腺苷和磷酸，磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀，再依次被置换为磷酸钴和硫化钴，最终产物为黑色硫化钴沉淀。 三磷酸腺苷酶( adenosine triphosphatase，ATPase)是一种水解酶，是催化ATP合成的一种酶。三磷酸腺苷酶根据所用激活剂、抑制剂以及酶定位的不同分为膜性三磷酸腺苷酶、肌球蛋白三磷酸腺苷酶、线粒体三磷酸腺苷酶等。ATPase能水解三磷酸腺苷为磷酸腺苷和磷酸，此酶只作用于磷酸与磷酸之间的高能键，因而释放大量能量。 贝博TM BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
显微镜
适用样本
1. 石蜡切片
2. 冰冻切片
3. 细胞爬片/涂片
2. 冰冻切片
3. 细胞爬片/涂片
仪器准备
恒温箱
试剂准备
1. 中性福尔马林固定液
2. 蒸馏水
2. 蒸馏水
耗材准备
1. 玻片2. 染缸
使用注意事项
1. ATP孵育液、硫化液易失效，最好分成小分储存，一经开启立即使用。
2. 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。
3. 对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
4. 以下步骤仅供参考，以实际样本和预实验情况进行调整，或者参考文献。
2. 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，应小心操作。
3. 对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
4. 以下步骤仅供参考，以实际样本和预实验情况进行调整，或者参考文献。
使用方法
冰冻切片/细胞爬片/涂片：
1. 冰冻切片直接入蒸馏水。
2. 入钙盐溶液中37℃温箱。
3. 入ATPase孵育液孵育，蒸馏水洗1min。
4. 入硝酸钴溶液，入蒸馏水。
5. 入中性福尔马林室温固定，流水冲洗2min。
6. 在上述过程中配制硫化工作液，即取试剂(E)用蒸馏水稀释50倍, 即为硫化工作液，即配即用。
7. 切片入硫化工作液孵育。
8. 流水洗10min后，入蒸馏水。
9. 甘油明胶封固。
石蜡切片：
1. 石蜡切片脱蜡后，入蒸馏水。
2. 入钙盐溶液中37℃温箱。
3. 入ATPase孵育液孵育，蒸馏水洗1min。
4. 入硝酸钴溶液，入蒸馏水。
5. 入中性福尔马林室温固定，流水冲洗2min。
6. 在上述过程中配制硫化工作液，即取试剂(E)用蒸馏水稀释50倍, 即为硫化工作液，即配即用。
7. 切片入硫化工作液孵育。
8. 流水洗10min后，入蒸馏水。
9. 石蜡切片经95%乙醇溶液及无水乙醇脱水。
10. 二甲苯透明，树胶封片。。
染色结果：
酶所在阳性部位 黑色或深棕色沉淀
阴性对照(可选做)：
1. 取对照切片，用试剂F-ATPase对照液进行孵育，并与用ATPase孵育液孵育的切片进行比较。两者反应相同部位可能有非特异性磷酸(单酯)酶存在，两者不同部位才是ATP酶活性所在。
2. 将切片入80℃蒸馏水10min，再与其他组织切片同时孵育，结果应为阴性。
1. 冰冻切片直接入蒸馏水。
2. 入钙盐溶液中37℃温箱。
3. 入ATPase孵育液孵育，蒸馏水洗1min。
4. 入硝酸钴溶液，入蒸馏水。
5. 入中性福尔马林室温固定，流水冲洗2min。
6. 在上述过程中配制硫化工作液，即取试剂(E)用蒸馏水稀释50倍, 即为硫化工作液，即配即用。
7. 切片入硫化工作液孵育。
8. 流水洗10min后，入蒸馏水。
9. 甘油明胶封固。
石蜡切片：
1. 石蜡切片脱蜡后，入蒸馏水。
2. 入钙盐溶液中37℃温箱。
3. 入ATPase孵育液孵育，蒸馏水洗1min。
4. 入硝酸钴溶液，入蒸馏水。
5. 入中性福尔马林室温固定，流水冲洗2min。
6. 在上述过程中配制硫化工作液，即取试剂(E)用蒸馏水稀释50倍, 即为硫化工作液，即配即用。
7. 切片入硫化工作液孵育。
8. 流水洗10min后，入蒸馏水。
9. 石蜡切片经95%乙醇溶液及无水乙醇脱水。
10. 二甲苯透明，树胶封片。。
染色结果：
酶所在阳性部位 黑色或深棕色沉淀
阴性对照(可选做)：
1. 取对照切片，用试剂F-ATPase对照液进行孵育，并与用ATPase孵育液孵育的切片进行比较。两者反应相同部位可能有非特异性磷酸(单酯)酶存在，两者不同部位才是ATP酶活性所在。
2. 将切片入80℃蒸馏水10min，再与其他组织切片同时孵育，结果应为阴性。
大包装和定制包装服务
-
优惠促销Promotion
-
轻松下单Order
-
在线留言Online message
-
帮助中心Help center