2-8℃避光

1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！

一年

显微镜

1.血涂片 2.冰冻切片

1. 显微镜
2. 恒温箱
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒

1. PBS缓冲液 2. 纯水

1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 载玻片

1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。
2. 血涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。
3. 涂片染色中，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液，以免染料沉着于涂片上。
4. ACP孵育液易失效。本法宜用皮肤穿刺血涂片，晾干后应及时染色。
5. GBC染色液尽量2-8℃保存，避免-20℃保存，以免潮解。
6. 对冰冻切片染色时，应减少切片再室温暴露的时间。
7. 样本需新鲜，取材后应立即处理，否则会影响酶的活性。
8. 组织固定需在4℃冰箱进行，时间不宜超过24h，否则酶活性会减弱或消失。
9. 一般不建议用石蜡切片。如果需要用石蜡切片，组织在石蜡包埋时，温度不宜高于56℃。应使用熔点为52～54℃的石蜡进行浸蜡，浸蜡时间要短，否则酶活性会减弱或消失。
10. 不纯的二甲苯会分解黑色沉淀，宜选用AR级以上的二甲苯。
11. 以下方法仅供参考，根据实际样本和参考文献情况进行调整。

1. 试剂配制：
使用前按试剂B1:B2:B3=10:5:90混合均匀，即为 ACP染色孵育液工作液B，现配现用。
2. 按常规方法制备血涂片，待涂片自然干燥。
【注】：
 推片方法：取新鲜全血或骨髓细胞液滴3ul左右置载玻片上，将推玻片保持与载玻片30度角，置于血滴正前方，稍往后移与血滴接触，即可见血液沿推片下缘散开，再均匀沿载玻片平面平稳向前滑动，至血液铺完血膜为止。
 涂片时不要太厚也不要太薄。太厚红细胞重叠并易皱，太薄时不易找到白细胞。
 用蜡笔在血膜两头划线，平放于染色架上。血膜要干透后才能染色，否则染色时血膜易脱落。
3. 滴加适量固定液A，使其盖满涂片，4℃固定30秒-3分钟。一般30-60秒即可。
【注】：
 试剂用量不能太少，以防很快蒸发引起染液沉淀。
4. 水洗30-60秒。稍微晾干。
【注】：
 注意不要过分干燥。
5. 涂片入ACP染色孵育液工作液B，37℃温箱避光浸染45-60分钟。
【注】：
 最好在孵育盒中进行，防止染色液挥发变干。
 太干后染色效果会变差。
6. 用水从玻片一端轻轻冲洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染3~5分钟。
【注】：
 染色过深或过浅应调整染色时间。
7. 水洗、晾干、镜检。

冰冻切片参考步骤：
1. 回温：将保存在-20℃冰箱中的冰冻切片放置到切片架上回温5-10分钟。可以放在37℃孵箱中进行回温，或者将切片架放置在一个小盒子中，将盒子置于37℃水浴锅中进行回温。
2. 水合：将回温好的切片，水中浸泡1-2分钟。
3. 固定：让切片在空气中自然晾干，再放入本试剂盒中的固定液A中固定1-3分钟，水洗30-60秒。
4. 孵育：水洗后还未完全干前放入ACP染色孵育液工作液B，37℃温箱避光浸染45-60分钟。太干后染色效果会变差。
5. 复染：孵育完后，取出水洗1分钟，在玻片未完全干前进行复染。可用苏木素复染5-10分钟。
6. 水洗、晾干、镜检。

结果分析：
阳性颗粒 紫红色；
细胞核 蓝色