产品概述
product description
碱性磷酸酶(简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内。细胞中的碱性磷酸酶,在碱性的缓冲液中,催化底物水解,生成物进而与一种稳定的黑色沉淀。经本试剂盒染色后,阳性者胞浆中出现棕褐色或咖啡色颗粒。 本试剂盒采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性。此法以天然存在的beta-甘油磷酸钠为底物,经酶水解释放出磷酸,磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀,再依次被置换为磷酸钴和硫化钴,最终产物为黑色硫化钴沉淀。
保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完!
2.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
3个月
检测方法
显微镜
适用样本
1. 石蜡切片
2. 冰冻切片
2. 冰冻切片
仪器准备
温箱或水浴锅
试剂准备
蒸馏水
耗材准备
一次性手套
使用注意事项
1、 使用前请仔细阅读说明书。
2、 所有的工作液请使用前新鲜配制,配制后立即使用。
3、 水洗后不要太干即放入孵育液中孵育,太干后染色效果会变差。
4、 用底物孵育液A孵育时要注意避光。
5、 试剂容易失效,开启后立即使用。
6、 样本需新鲜,取材后立即处理,否则会影响酶的活性。
7、 组织固定需要在4℃冰箱进行,时间不宜超过24小时,否则酶活减弱或消失。
8、 石蜡包埋温度不宜高于56℃。应使用熔点52-54℃石蜡进行浸蜡,浸蜡时间不宜过长,否则酶活减弱或消失。
9、 冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
10. 不纯的二甲苯会分解黑色沉淀,宜选用AR级以上的二甲苯。
2、 所有的工作液请使用前新鲜配制,配制后立即使用。
3、 水洗后不要太干即放入孵育液中孵育,太干后染色效果会变差。
4、 用底物孵育液A孵育时要注意避光。
5、 试剂容易失效,开启后立即使用。
6、 样本需新鲜,取材后立即处理,否则会影响酶的活性。
7、 组织固定需要在4℃冰箱进行,时间不宜超过24小时,否则酶活减弱或消失。
8、 石蜡包埋温度不宜高于56℃。应使用熔点52-54℃石蜡进行浸蜡,浸蜡时间不宜过长,否则酶活减弱或消失。
9、 冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
10. 不纯的二甲苯会分解黑色沉淀,宜选用AR级以上的二甲苯。
使用方法
使用方法:
1、 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2、 冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液中4℃固定2-5分钟。
3、 切片入试剂A,37℃孵育。冰冻切片5-15分钟,石蜡切片2-12小时。
4、 流水冲洗2分钟后入蒸馏水。
5、 入试剂B,37℃,5分钟。
6、 流水冲洗5分钟后入蒸馏水。
7、 试剂C用蒸馏水50倍稀释,即配即用。
8、 切片入试剂C稀释液2分钟。
9、 流水冲洗10分钟后入蒸馏水。
10. 冰冻切片用甘油明胶封片;石蜡切片常规脱水,透明,树胶封片。
结果分析:
酶活性部位: 黑色沉淀
对照片处理方法:
切片入孵育液前,先经碘、5%硫代硫酸钠溶液各3分钟,充分水洗后,用试剂D取代试剂A,按上述步骤处理即可。
1、 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2、 冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液中4℃固定2-5分钟。
3、 切片入试剂A,37℃孵育。冰冻切片5-15分钟,石蜡切片2-12小时。
4、 流水冲洗2分钟后入蒸馏水。
5、 入试剂B,37℃,5分钟。
6、 流水冲洗5分钟后入蒸馏水。
7、 试剂C用蒸馏水50倍稀释,即配即用。
8、 切片入试剂C稀释液2分钟。
9、 流水冲洗10分钟后入蒸馏水。
10. 冰冻切片用甘油明胶封片;石蜡切片常规脱水,透明,树胶封片。
结果分析:
酶活性部位: 黑色沉淀
对照片处理方法:
切片入孵育液前,先经碘、5%硫代硫酸钠溶液各3分钟,充分水洗后,用试剂D取代试剂A,按上述步骤处理即可。
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