产品概述
product description
通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。
保存温度
室温密封
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完!
2.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
显微镜
适用样本
细菌
产品特点
贝博快速革兰染色液可缩短染色时间,通常经过初染—媒染—脱色—复染四步,整个染色过程只需5分钟,不容易造成假阳性和假阴性,能够准确鉴别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,具有操作简便、方法可靠,试剂性质稳定、保质期长,结果易于观察等特点。
仪器准备
1. 玻片
2. 染缸
3. 滴管
4. 光学显微镜
2. 染缸
3. 滴管
4. 光学显微镜
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1、 标本涂片不能太厚。较厚的涂片应延长脱色时间。
2、 固定时通过火焰的温度不能太高。
3、 脱色剂脱色是革兰氏染色的重要步骤,如脱色过度则阳性菌误染成阴性菌,如脱色不够,则阴性菌误染成阳性菌,脱色时间要掌握好。
4、 在实验中如果出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全。假阴性可能是因为细胞固定过度,造成细胞壁通透性的改变,而出现假阴性结果;另外,细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶,也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果。
2、 固定时通过火焰的温度不能太高。
3、 脱色剂脱色是革兰氏染色的重要步骤,如脱色过度则阳性菌误染成阴性菌,如脱色不够,则阴性菌误染成阳性菌,脱色时间要掌握好。
4、 在实验中如果出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全。假阴性可能是因为细胞固定过度,造成细胞壁通透性的改变,而出现假阴性结果;另外,细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶,也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果。
使用方法
1、涂片:
液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而均匀。
2、 晾干:让涂片在空气中自然干燥。
3、 固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。
4、 染色:将固定过的涂片放报纸上,滴加初染液,染1min。
5、 水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
6、 媒染:滴加1滴媒染液,染1min,水洗。
7、 脱色:吸去残留水,滴加脱色液脱色20-30s,将玻片不停摇动,至流出液无紫色,立即水洗。
8、 复染:滴加复染液复染3-5min,水洗。
9、 结果观察。
结果分析:
革兰氏阳性菌都呈紫色,革兰氏阴性菌都呈红色
液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而均匀。
2、 晾干:让涂片在空气中自然干燥。
3、 固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。
4、 染色:将固定过的涂片放报纸上,滴加初染液,染1min。
5、 水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞形态。
6、 媒染:滴加1滴媒染液,染1min,水洗。
7、 脱色:吸去残留水,滴加脱色液脱色20-30s,将玻片不停摇动,至流出液无紫色,立即水洗。
8、 复染:滴加复染液复染3-5min,水洗。
9、 结果观察。
结果分析:
革兰氏阳性菌都呈紫色,革兰氏阴性菌都呈红色
-
优惠促销
Promotion
-
轻松下单
Order
-
在线留言
Online message
-
帮助中心
Help center