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产品概述
product description
Masson染色是用于显示组织中纤维的染色方法之一，是胶原纤维（collagen fiber）染色权威而经典的技术方法。主要适用于胶原蛋白和平滑肌的鉴别分析。广泛用于结缔组织、肌肉组织和胶原蛋白的研究等。 贝博TM BBcellProbeTM Masson染色试剂盒利用不同阴离子染料先后作用完成染色，根据组织不同的渗透性，选择分子大小不同的阴离子染料进行染色，区分不同组织成分。小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。苯胺蓝的分子量很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色(苯胺蓝)，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。操作简捷，性能稳定，显色清晰。
保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
显微镜
适用样本
1. 石蜡切片
2. 冰冻切片
2. 冰冻切片
仪器准备
1. 显微镜
2. 37℃温箱
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
2. 37℃温箱
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
1. 固定液：选用甲醛升汞或甲醛盐溶液
2. 蒸馏水
3. 系列乙醇
2. 蒸馏水
3. 系列乙醇
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1. 取A1、A2等量混合即为 Weigert铁苏木素染液，一般24h失去染色力。
2. 每个染色步骤均要保持玻片湿润。
3. 切片脱蜡应尽量干净。
4. 固定起着重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
5. 试剂B分化时间应根据切片厚薄、组织类型很新旧不同。
6. 试剂F磷钼酸分化时要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定，一般1～2min。
7. 镜检观察时若胶原纤维部分蓝色着色太浅，可用复染液复染2-3分钟，至颜色合适为止。复染液染色时间不宜过长，否者颜色过深会造成对比不强烈。
8. 若整体染色效果不佳，可用水浸泡60-90分钟，褪色后，再重复染色。
2. 每个染色步骤均要保持玻片湿润。
3. 切片脱蜡应尽量干净。
4. 固定起着重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
5. 试剂B分化时间应根据切片厚薄、组织类型很新旧不同。
6. 试剂F磷钼酸分化时要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定，一般1～2min。
7. 镜检观察时若胶原纤维部分蓝色着色太浅，可用复染液复染2-3分钟，至颜色合适为止。复染液染色时间不宜过长，否者颜色过深会造成对比不强烈。
8. 若整体染色效果不佳，可用水浸泡60-90分钟，褪色后，再重复染色。
使用方法
试剂配制：
临用前A1和A2等量混合均匀即为染液A，24小时内使用，不可预先配制。
样本的染色前处理：
石蜡切片
1. 脱蜡：二甲苯中脱蜡10-15分钟。再换用新鲜的二甲苯脱蜡10-15分钟。
2. 将脱蜡后的片子用95%乙醇浸泡2分钟，再分别用70%、30%乙醇各2分钟。
3. 水合：蒸馏水中浸泡2分钟。
4. 漂洗：30-40℃水漂洗两次，每次30-60秒。
样本的染色
1. 用蒸馏水润湿玻片30-60秒。
2. 用新鲜配制的染色液A染色5-10分钟。
3. 分色液B分色6-8分钟。水洗。
4. 试剂C处理2-3分钟。
5. 蒸馏水水洗1-2分钟。
6. 染色液D染色5-10分钟。
7. 按蒸馏水：弱酸E=2:1配制弱酸工作溶液，用弱酸工作液洗1分钟。
8. 试剂F洗1-2分钟。需要在镜下观察，处理到胶原纤维城淡红色；纤维红色即可。
9. 用弱酸工作液洗1分钟。
10. 染色液G苯胺蓝染色1-2分钟。
11. 用弱酸工作液洗1分钟。
12. 95%乙醇快速脱水。
13. 无水乙醇脱水3次，每次5秒。
14. 二甲苯透明3次，每次1分钟。
15. 用封固剂封片。
16. 结果观察。
结果：
细胞核、胶原纤维、粘液、软骨为蓝色；
胞浆、肌肉、红细胞、纤维素、神经胶原为红色。
临用前A1和A2等量混合均匀即为染液A，24小时内使用，不可预先配制。
样本的染色前处理：
石蜡切片
1. 脱蜡：二甲苯中脱蜡10-15分钟。再换用新鲜的二甲苯脱蜡10-15分钟。
2. 将脱蜡后的片子用95%乙醇浸泡2分钟，再分别用70%、30%乙醇各2分钟。
3. 水合：蒸馏水中浸泡2分钟。
4. 漂洗：30-40℃水漂洗两次，每次30-60秒。
样本的染色
1. 用蒸馏水润湿玻片30-60秒。
2. 用新鲜配制的染色液A染色5-10分钟。
3. 分色液B分色6-8分钟。水洗。
4. 试剂C处理2-3分钟。
5. 蒸馏水水洗1-2分钟。
6. 染色液D染色5-10分钟。
7. 按蒸馏水：弱酸E=2:1配制弱酸工作溶液，用弱酸工作液洗1分钟。
8. 试剂F洗1-2分钟。需要在镜下观察，处理到胶原纤维城淡红色；纤维红色即可。
9. 用弱酸工作液洗1分钟。
10. 染色液G苯胺蓝染色1-2分钟。
11. 用弱酸工作液洗1分钟。
12. 95%乙醇快速脱水。
13. 无水乙醇脱水3次，每次5秒。
14. 二甲苯透明3次，每次1分钟。
15. 用封固剂封片。
16. 结果观察。
结果：
细胞核、胶原纤维、粘液、软骨为蓝色；
胞浆、肌肉、红细胞、纤维素、神经胶原为红色。
参考文献
1. Yuyan Lu, et al.
Valsartan attenuates pulmonary hypertension via suppression of mitogen activated protein kinase signaling and matrix metalloproteinase expression in rodents
Molecular Medicine Reports 2017
2. Fei Hou, et al.
Attenuation of liver fibrosis by herbal compound 861 via upregulation of BMP-7/Smad signaling in the bile duct ligation model rat
Molecular Medicine Reports 2016
3. Huikuan Gao, et al.
Sequential changes in autophagy in diabetic cardiac fibrosis
Molecular Medicine Reports 2015
Valsartan attenuates pulmonary hypertension via suppression of mitogen activated protein kinase signaling and matrix metalloproteinase expression in rodents
Molecular Medicine Reports 2017
2. Fei Hou, et al.
Attenuation of liver fibrosis by herbal compound 861 via upregulation of BMP-7/Smad signaling in the bile duct ligation model rat
Molecular Medicine Reports 2016
3. Huikuan Gao, et al.
Sequential changes in autophagy in diabetic cardiac fibrosis
Molecular Medicine Reports 2015
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