细胞膜完整性检测试剂盒-红色荧光

BB-44203
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产品概述 product description

贝博® BBcellProbe® T11细胞膜完整性检测试剂盒是利用BBcellProbe® T系列探针进行细胞染色的试剂盒。本试剂盒中的BBcellProbe® T11细胞染色探针为红色荧光标记的细胞探针，具有550/610nm的最大激发/发射波长。 BBcellProbe® T11探针是对细胞膜损伤细胞进行染色的试剂，不能穿透正常细胞膜，只有当细胞膜完整性受到影响时才可以染色细胞，进入细胞后会与细胞内蛋白质紧密结合，可有效标记膜不完整细胞。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
显微镜
适用样本
动物细胞
仪器准备
1. 荧光显微镜/激光共聚焦/流式细胞仪/荧光酶标仪/荧光光度计等
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
1. PBS缓冲液
2. 或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
2. 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
3. 染色后立即进行分析。
4. 以下以显微镜观察为例，也可以根据需要设定对照细胞，用破膜剂破膜后染色，用流式/酶标仪/荧光光度计等设备检测样品细胞相对于对照细胞的膜破损率。
使用方法
染色工作液配制
用染料稀释液将T11细胞染料50-500倍稀释，配成染色工作液，充分混匀备用。
【注】:
 也可以不用试剂盒中的稀释液，直接用PBS等稀释。

细胞染色
对于贴壁细胞
1. 制备需要检测的细胞模型。
2. 待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的染色液。于生长状态下孵育1分钟～10分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。
3. 用PBS/HBSS洗涤细胞3-4次。每次尽可能吸干PBS。
【注】:
 注意细胞操作的整个过程，避免人为的细胞膜损伤。例如采用合适的离心力大小。
4. 加入新鲜培养基或PBS并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。
最大激发/发射波长550/610nm。
【注】:
 若细胞染色太强，建议降低染料浓度或缩短染色时间。
 若染色不够充分，完全无荧光细胞，建议增加染料浓度或延长染色时间。

对于悬浮细胞
1. 离心，吸除上清。
2. 利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育1分钟～10分钟（具体时间需根据细胞类型而定）。
3. 离心，吸除染色液。
4. 用PBS/或HBSS洗涤细胞3-4次。每次尽可能吸干PBS。
【注】:
 注意细胞操作的整个过程，避免人为的细胞膜损伤。例如采用合适的离心力大小。
5. 加入新鲜培养基或PBS重悬细胞。
6. 置于荧光镜下观察。
最大激发/发射波长550/610nm。
【注】:
 对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
 若细胞染色太强，建议降低染料浓度或缩短染色时间。
 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。

观察结果：
在荧光显微镜（含合适滤片）下观察细胞。最大激发/发射波长为550/610nm。
膜完整细胞没有荧光，膜不完整细胞显红色荧光。

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