贝博® BBcellProbe® 细胞骨架染色试剂盒采用丝状肌动蛋白F-actin荧光染色法染色细胞骨架，可以用于各种动物、植物的细胞骨架染色。 本试剂盒采用荧光探针BBcellProbe® 633标记的鬼笔环肽（Phalloidin）标记骨架蛋白F-actin。BBcellProbe® FLUOR 633为红色荧光探针，贝博也为客户提供绿色和蓝色荧光的BBcellProbe® C11-Phalloidin和BBcellProbe® C13-Phalloidin标记试剂盒。贝博可以满足您完整的F-Actin微丝蛋白荧光染色方案，为您提供极大的选择空间和便利。 细胞骨架(cytoskeleton）是真核细胞中由蛋白质聚合而成的三维的纤维状网架体系。细胞骨架包括微丝、微管和中间纤维。细胞骨架在维持细胞形态，承受外力、保持细胞内部结构的有序性方面起重要作用。细胞骨架肌动蛋白是球形的、大约42kd的蛋白，在几乎所有的真核细胞都存在。这是一个非常保守的蛋白，在各物种差异不超过20%。肌动蛋白是两种细胞内丝状结构的构成单体：微丝（三种主要的细胞骨架成分之一），以及细肌丝（是肌肉细胞收缩复合物的一部分）。肌动蛋白参与很多重要的细胞功能，包括肌肉收缩，细胞移动，细胞分裂和胞质分裂、小泡和细胞器的运动、细胞信号，以及细胞连接和细胞形态的保持和建立。 显示细胞骨架的常用方法有两种：骨架蛋白染色法和免疫荧光染色法。骨架蛋白染色法具有简单易行的特点，但不能区分骨架蛋白的组成，有些类型的纤维太细,在光学显微镜下无法分辨，常用于骨架形态及完整性研究；免疫荧光染色法可特异显示骨架蛋白，是用一种微丝解聚抑制剂,它与肌动蛋白纤丝有强亲和作用,使肌动蛋白纤丝稳定,抑制解聚,且只与F-actin结合.因此,利用荧光标记可以清晰显示细胞中微丝的形态,利用荧光显微镜对荧光标记的细胞骨架进行观察,可以得到清晰的实验结果.具有更普遍的应用意义。 没有荧光观察条件，需要常规骨架蛋白染色试剂盒，可以选择贝博产品号BB-4440的试剂盒。 鬼笔环肽（Phalloidin）是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏（Amanita phalloides）的环状七肽毒素，以高亲和力（Kd= 20 nM）选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin，而不会与单体肌动蛋白G-actin结合，通常用来标记组织切片，细胞培养物或无细胞体系中的F-actin，从而对F-actin进行定性和定量分析。另外，鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维，无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞，按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略，染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此，鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白（Actin）抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小，直径约12-15Å，分子量＜2000 Daltons，未标记肌动蛋白（Actin）的许多生理特性都得以维持，比如，同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNase I等仍能发生反应；鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质；以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。鬼笔环肽（Phalloidin）的结合阻止丝状肌动蛋白（微丝）的解离，稳定微丝结构，从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度（CC）降至＜1µg/mL，因此，可用作一种聚合促进剂。此外，鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。 用荧光标记的鬼笔环肽染色可以清晰地显示细胞中微丝的分布。将鬼笔环肽注射到细胞中同样能阻止细胞运动，可见微丝的功能依赖于肌动蛋白的组装和去组装的动态平衡。鬼笔环肽这种性质使得它们成为一种探索F-Actin分布的的良好工具，可以通过用带有各种荧光探针的鬼笔环肽结合Actin丝状物在荧光显微镜下观察来实现。鬼笔环肽的荧光衍生物已经被证明在活体或固定细胞内定位Actin丝状物和在体外观察actin丝状物的实验中起重要作用。 BBcellProbe® FLUOR 633-Phalloidin染色反应特异性强，对比性高，具有比Actin抗体更好的染色效果，适合用作F-actin的定性和定量检测。另外，经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性，适用性广泛。BBcellProbe® FLUOR 633-Phalloidin可以广泛用于固定、通透性细胞，但也可以进入活细胞中。