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贝博® BBcellProbe® E03细胞内质网染色试剂盒是利用BBcellProbe® E02荧光进行内质网特异性荧光染色的试剂盒。 BBcellProbe® E探针是一系列具有细胞膜透过性，对活细胞内质网具有高度选择性的探针，不像传统的内质网荧光探针，该系列探针几乎不对线粒体着色，且在较低浓度即可实现对内质网的染色，且对细胞几乎无毒性。 BBcellProbe® E探针高度结合ATP-敏感型K+通道的磺脲类受体，该受体富集存在于内质网上，因此BBcellProbe® E探针适合用作内质网荧光探针，BBcellProbe® E02最大激发波长为483nm，最大发射波长为500nm。 BBcellProbe® E系列内质网探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针，贝博® 还可以提供红色、橙色、深红色等颜色的染色试剂盒。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.吸头
3.一次性手套
2.E03染色探针液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
6.染色后立即进行分析。
7.本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
根据样本数量，用37℃培养箱预热HBSS或PBS或其他缓冲液将BBcellProbe® E02荧光染料500-1000倍稀释。配制成染色工作液。
2． 细胞染色
悬浮细胞染色
1) 用HBSS洗涤细胞2次。
2) 加入适量体积的预热的染色工作液重悬细胞。
3) 在37 ℃孵育细胞5～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用10分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 孵育结束，500×g离心2分钟。
5) 移除上清液，加入37℃预热的培养基重悬细胞。
6) 在激光共聚焦显微镜观察细胞。
贴壁细胞染色
1) 用HBSS洗涤细胞2次。
2) 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的预热染色工作液。
3) 37 ℃孵育细胞 5～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用10分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 吸干染色工作液，加入新鲜培养基。
5) 在激光共聚焦显微镜观察细胞。
3． 用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜检测。
激发波长为488nm，最大发射波长为500nm。
已染色细胞用固定后，仅部分荧光探针留在细胞内，荧光信号会有部分衰减。
2.固定细胞的方法？
用4%甲醛于37℃固定细胞2min。 细胞固定后，可用合适缓冲液进行清洗，每次5min，共2次。清洗后可对细胞进行后续封片、镜检或进一步染色。
3.可以对细胞进行透化处理吗？
不建议对细胞进行透化处理，因为经Triton X-100或其它透化剂透化后，细胞内将无荧光信号保留。
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