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贝博® BBcellProbe® M21线粒体染色试剂盒是利用BBcellProbe® M系列探针进行线粒体特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的BBcellProbe® M21线粒体染色探针为蓝色荧光标记的线粒体探针,具有345 / 468 nm的最大激发/发射波长。本品适合双标实验,因其蓝色荧光与其他的绿色、红色荧光探针具有良好的分辨率。 BBcellProbe® M系列探针是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色的一类新型荧光染料,该系列探针可以选择性标记线粒体,包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞,即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。可有效标记活细胞。 虽然传统的线粒体荧光探针如TMR和罗丹明123,也能很容易的聚集在功能线粒体上,但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉,从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体能量状态影响因子的实验中,使其应用大受限制,而BBcellProbe® M系列探针不受线粒体膜电位影响。 BBcellProbe® M系列线粒体探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的蓝色荧光探针,贝博还可以提供绿色、红色、橙色等颜色的染色试剂盒。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞、组织染色,免疫组织化学,细胞培养等相关试剂盒产品。
2.荧光染色剂为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完!
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.吸头
3.一次性手套 4.荧光检测专用黑色透明底96孔板
2.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5.染色后立即进行分析。
6.必须用荧光检测专用黑色透明底96孔板。
根据样本数量,用染料稀释液将BBcellProbe® M21荧光染料10倍稀释,再用相应的无血清培养基或者HBSS缓冲液10倍稀释,配制成染色工作液。
2. 细胞染色
1)培养板准备细胞样本。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入100 μl 37℃预热的探针工作液。于生长状态下孵育30分钟~120分钟(具体孵育时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。
3)利用HBSS/PBS/新鲜培养基替换上述染色液。
4)激光共聚焦/荧光显微镜(含合适滤片)或下拍照观察。
最大激发/发射波长为345 / 468 nm。
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