细胞膜染色试剂盒Dio(绿色荧光)

BB-441113
选择规格
  • 1000 T
价格
  • ¥1000元
数量
产品概述 product description

贝博® BBcellProbe® DiO细胞膜染色试剂盒是利用DiO荧光探针进行细胞膜特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的DiO细胞膜染色探针为绿色荧光标记的细胞膜探针,具有484 / 501nm的最大激发/发射波长。 DiO探针是对活细胞的细胞膜进行选择性染色的一类荧光染料,该系列探针可以选择性标记细胞膜。当亲脂性的绿色荧光探针DiO进入细胞膜后,在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。 荧光探针DiO通常不会明显影响细胞的活力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。 贝博细胞膜探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针,贝博还可以提供其它的绿色探针、红色、橙色、深红色等颜色的染色试剂盒。 以96孔板每孔200μl染色液计,本试剂盒小包装可以染色1000-5000个样本。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞、组织染色,免疫组织化学,细胞培养等相关试剂盒产品。

保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.Dio荧光探针在2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
2.荧光染色剂为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
6个月
检测方法
荧光显微镜/激光共聚焦
适用样本
动物细胞
产品应用
荧光显微镜/激光共聚焦
仪器准备
1.荧光显微镜/激光共聚焦
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 2.HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.DiO染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
6.染色后立即进行分析。
7.本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。

使用方法
1. 染色工作液的配制:
根据样本数量,用37℃培养箱预热HBSS或相应的无血清培养基或其他缓冲液将DiO荧光染进行500-2500倍稀释,配制成染色工作液。
2. 细胞染色
悬浮细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 加入适量体积的染色工作液重悬细胞,使其密度大约为1×106/mL。
3) 在37 ℃孵育细胞 5~120分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 孵育结束,500 g离心5分钟。
5) 倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的培养基重悬细胞。
6) 重复(4),(5)步骤两次以上

贴壁细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3) 37 ℃孵育细胞 5~120分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 吸干染色工作液,用培养液洗培养板或盖玻片2~3次,每次用预热的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10分钟,然后吸干培养基。

3. 用荧光显微镜或流式细胞仪检测
激发波长为488 nm,最大发射波长为501 nm。
参考文献
1.Zhenwei Lian et al.
Exosomes derived from normal human bronchial epithelial cells down-regulate proliferation and migration of hydroquinone-transformed malignant recipient cells via up-regulating PTEN expression
Chemosphere 2019 (IF=7.086)

2.Ran Jiang et al.
Exosomal miR‐221 derived from hydroquinone‐transformed malignant human bronchial epithelial cells is involved in cell viability of recipient cells
Journal of Applied Toxicology 2019

3.XianHong Yi et al.
Exosomes Derived from Hydroquinone-transformed Human Bronchial Epithelial Cells Inhibited Recipient Cell Apoptosis by transferring miR-221
Biomedical and Environmental Sciences 2021