贝博® Exo-Isolation® 外泌体(Exosomes)吸附抑制剂是抑制细胞外囊泡吸附于样本管或移液吸头等实验耗材的聚合物混合物试剂。能防止实验过程中和保存时细胞外囊泡吸附所引起的损耗,提高外泌体回收率。本品可在细胞外囊泡(含外泌体)的超滤、提取和保存前使用。 外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性小囊泡,直径约为30-150nm,天然存在于血液、唾液、尿液和母乳等各种体液中,研究发现,Exosome内含有与细胞来源相关的蛋白质、mRNA和microRNA,并且exosome能够通过生物屏障,在细胞间传递功能性核酸分子,从而发挥各种生物学功能。 外泌体囊泡已经成为细胞间通讯的重要介质,参与原核生物和高等真核生物细胞之间的生物信号传递,以调节不同范围的生物过程。外泌体囊泡的病理生理作用开始在包括癌症、感染性疾病和神经变性疾病在内的疾病中得到充分认识,显现了外泌体作为疾病的早期诊断、治疗干预的潜在新靶点的巨大应用前景。此外,未修饰和工程化的外泌体囊泡可能在大分子药物递送中具有应用价值。 在外泌体的提取以及保存过程中,由于受实验过程中所使用的各种耗材的材料表面的润湿性、表面的功能基团、表面电荷、亲水性或疏水性基团等影响,外泌体会有大量的吸附损耗。贝博® Exo-Isolation® 外泌体(Exosomes)吸附抑制剂采用高分子聚合物在外泌体与材料表面之间形成阻隔,使外泌体游离在溶液中,不与容器或耗材壁结合,有效减少材料对外泌体的吸附损耗。 在血清、血浆或其它蛋白质杂质较多的样本外泌体提取前,本品的使用效果会受到影响,吸附抑制率会下降。血清、血浆样品的外泌体提取后的保存环节,效果不受影响。 本试剂按1:20加入细胞外泌体样品使用。加入本品可最大限度抑制耗材对外泌体的吸收,增加外泌体回收率,尤其适用于外泌体分泌量较少的细胞。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对不同下游实验应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。 贝博® BBproExtra® 还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
2.试剂拆封后请尽快使用完!
2.用法简单,只需往样本中添加本品即可。
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒
2.吸头
3.一次性手套
2.本品含有聚合物,会部分残留于外泌体上。
1. 将外泌体吸附抑制剂添加到待提取的细胞培养上清中,20倍稀释于细胞培养上清。
2. 上下颠倒或轻敲使其混合。
3. 进行下游外泌体提取。
提取其它样本细胞外泌体:
1. 将外泌体吸附抑制剂添加到样品中,20倍稀释于样品中。
2. 颠倒或轻敲使其混合。
3. 进行下游外泌体提取。
保存已经提取的外泌体:
1. 将外泌体吸附抑制剂添加到所提取的细胞外泌体中,20倍稀释于细胞外泌体储存液。
2. 颠倒或轻敲使其混合。
细胞培养过程中使用:
在进行细胞培养前,将外泌体吸附抑制剂按照1/20加到培养基中。则可以抑制培养皿对外泌体的吸附。
通常使用透射电镜检测(形态)、粒径检测(大小)、外泌体标志蛋白Western blot检测等方法鉴定提取的外泌体。
2.外泌体WB标志蛋白用什么?
在进行WB检测时,通常检测外泌体标志蛋白为CD63、CD9、CD81、TSG101 、ALIX、HSP70等。
3.进行外泌体WB鉴定时有什么内参蛋白可供选择?
没有,该检测属于定性检测。
4.蛋白浓度低?
很多细胞外泌体量不够下游应用,在条件允许的情况请尽可能加大培养上清的上样量。
处理部分样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。请选择高质量的蛋白裂解液或蛋白提取试剂盒。
5.抽提得到的RNA浓度低?
很多细胞外泌体量不够下游应用,在条件允许的情况请尽可能加大培养上清的上样量。
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