2-8℃

1.浓缩柱配有2个微量离心管。
2.在操作过程中，一个可用于收集滤出液，而另一个用于回收浓缩后的样本。
3.用过的浓缩管要保持过滤膜湿润，不能干掉。

一年

1.高回收率 >90%；
2.垂直结构的膜减少了浓差极化，加快离心速度，快达 5 分钟；
3.热密封膜将下游溶出物污染可能性降到最低；
4.100% 完整性检测确保性能可靠；
5.透明外壳和体积刻度方便样品察看；
6.直接吸取样品减少处理步骤；
7.高浓缩倍数：高达80–100 倍

1.不同的蛋白浓缩的速度不同，有的需要长时间离心，有的则很快就好。和蛋白样品纯度，所用buffer类型，蛋白的浓度有关系。离心时要先短些时间，观察一下浓缩速度；
2.如果需要多次重复使用，离心速度不要太高；
3.重复使用时要仔细检查管壁上有没有裂纹；
4.浓缩柱浓缩蛋白会有蛋白损失，样品体积大就分批离心，尽可能不要离心时间太长
5.样品里的杂质如果可能尽量在离心前去除一些。
6.分子量小于5kD的溶质可能只有部分被截留。2kD的样品截留率大约只有40%。目的蛋白小于5kD的样品不要使用浓缩管法浓缩。
7.浓缩液的样本回收率低可能是由于吸附损失、过度浓缩，或样本穿过滤膜而造成的。
8.吸附损失取决于溶质浓度、疏水性、与过滤浓缩管表面接触的温度和时间、样本成分及pH。为了最大限度降低损失，离心后请立即回收浓缩后的样本。
9.如果样本的起始浓度很高，请监控离心过程，以免样本过度浓缩。过度浓缩会导致沉淀，这也可能带来样本损失。
10.样本有可能穿过滤膜，务必将每次的滤过液一直保留到浓缩的样品分析测试完成。
11.样品蛋白最低起始浓度为25ug/ml。
12.加蛋白液或Buffer到浓缩管时，可以用蓝枪头；但从浓缩管底吸取浓缩好的目的蛋白时，必须用黄枪头；用枪头伸入浓缩管中时，必须防止碰到滤膜，以免戳破滤膜。

产品规格参数：
初始样本的最大体积：500ul
最终浓缩液的典型体积：15-20ul
建议的相对离心力：10,000 x g（浓缩离心）
1,000 x g（反转离心）
最大的相对离心力： 12,000 x g
清洗浓缩管：
1. 用缓冲液或纯水进行预清洗。也可先用0.1 M NaOH清洗，再用缓冲液或纯水进行二次清洗。
2. 离心管中的过滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。

蛋白样品处理:
1. 在500ul蛋白样品中加入5ul蛋白吸附抑制剂。充分混匀待浓缩。
2. 吸附抑制剂按照1/100加到待浓缩蛋白样品。


操作步骤：
1. 将内管插入所提供的一个微量离心管中。
2. 向内管中加入不超过500 ul的样本，并盖上盖子。
3. 将盖好盖子的浓缩管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中央；用一个类似的离心管平衡。
4. 以2000-10000 x g离心约10-30分钟。
【注】：
 务必将滤过液一直保留到浓缩的样品分析测试完成。
 影响流速的因素包括样本浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。500ul样本的典型离心时间大约是10至30分钟。尽管大部分样本在离心开始后的前5至10分钟发生过滤，但在离心10至30分钟后才能达到最低的浓缩液体积（15-20ul）。
5. 离心结束后将整个浓缩管从离心机中取出，取出内管。
6. 为了回收浓缩后的溶质，将内管倒过来插在另一个干净的微量离心管中。放在离心机中，让打开的盖子朝着转子的中央；用一个类似的离心管进行平衡。以1,000 x g离心2分钟，使浓缩后的样本从浓缩内管转移到收集管中。滤液可以保存在收集管中。
7. 将蛋白浓缩管清洗后用于浓缩其它蛋白样品。

清洗和保存：
1. 使用后用水冲洗干净；
2. 内管加入超纯水500µl，5000g离心5分钟；
3. 净内管中的水，加入500µl 0.1M NaOH，5000g离心20分钟；
4. 用0.1M NaOH 浸泡24小时；
5. 用水冲洗干净；
6. 用无菌水浸泡2-8℃保存。
7. 外管用自来水洗净后，用超纯水冲洗干净，晾干。

1.蛋白浓缩柱会损失蛋白吗？
分子量小于3000 Da的蛋白质或多肽样品会穿透过滤膜，不适合用本浓缩柱进行浓缩。3000 -6000Da的蛋白质会有少量损失。6000Da以上的蛋白质损失很小。

2.膜会因为离心时间过长而变干么？
不会，因为浓缩柱有死体积，总会有溶液残留在滤管中。死体积大约10-20ul。

3.可以重复使用浓缩柱么？
可以重复使用。如果使用、清洗、保存得当，可以反复使用多次。但是多次重复使用后过滤膜有破损风险，注意使用过程中尽量避免尖锐物品戳到膜。离心力不要过大。

4.蛋白在浓缩时出现了沉淀，如何改进？
蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的最终浓度不超过20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白， 建议的改进方法是：1）离心力降低30%-50%
2）在浓缩过程中取出浓缩管，用枪头反复吹吸几次