细胞匀浆缓冲液

BB-37712
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  • 100ml
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产品概述 product description

贝博® BBproExtra® 细胞匀浆缓冲液采用优质原料配制，适用于各种培养细胞和各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织样品中匀浆提取总蛋白用。 本细胞匀浆缓冲液采用Hepes缓冲液系统，适用于不能含有Tris缓冲液的环境。缓冲液pH7.4。 匀浆得到的蛋白样品可以用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 经过本匀浆缓冲液匀浆的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白，下游应用范围广。 本匀浆缓冲液中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。 本匀浆缓冲液中不含有蛋白酶抑制剂，进行蛋白质匀浆时根据需要加入蛋白酶抑制剂混合物。 本裂解液提取的蛋白样本含有盐成分，不可直接用于2D电泳。也可以将最后样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理（相关产品BB-38113）。 本细胞匀浆缓冲液采用Hepes缓冲液系统，需要Tris缓冲液匀浆液的可以选择贝博其它货号的产品（相关产品BB-3771）。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。

保存温度
2-8℃
注意事项
试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂。
4.下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，匀浆缓冲液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。
使用方法
A． 细胞匀浆
1. 取5-10×106个细胞，在4℃，1000×g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每5×106个细胞中加入500 μl冷的细胞匀浆缓冲液，混匀后，用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
4. 在4℃，12000-14000×g条件下离心10分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

B． 组织匀浆
1. 取100 mg组织样本剪碎，加入1 ml匀浆缓冲液，用组织匀浆器/匀浆机充分匀浆至无明显肉眼可见固体。
2. 在4℃，12000×g条件下离心10分钟。
3. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

上述匀浆液可分装后于-80℃冰箱保存备用。

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