产品概述
product description
贝博TM BBproExtra® SDS-PAGE分离胶缓冲液(4X)用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。 贝博TM可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒,包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒,专用于蛋白质谱检测的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。贝博TM还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
有效期
3个月
产品应用
10000
仪器准备
1. 凝胶模具
2. 移液器
2. 移液器
试剂准备
1. Acr-Bis(30%,29:1)
2. 10%APS(过硫酸铵)
3. TEMED
4. 蒸馏水
2. 10%APS(过硫酸铵)
3. TEMED
4. 蒸馏水
耗材准备
1. 离心管2. 吸头
使用注意事项
1. 过硫酸铵配制成10%溶液后应当-20℃保存。应尽量减少室温存放时间以防失效。有效避免失效的方法是分成小份,-20℃保存,用2~3次,剩余的弃用,亦可4℃保存几天。
2. TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3. 配制聚丙烯凝胶的过程中,如果室温较低,可以置于37℃放置,加速凝固。
4. Acr-Bis(30%,29:1)有轻微神经毒性,请小心操作。
5. 根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表。
2. TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3. 配制聚丙烯凝胶的过程中,如果室温较低,可以置于37℃放置,加速凝固。
4. Acr-Bis(30%,29:1)有轻微神经毒性,请小心操作。
5. 根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表。
使用方法
灌制分离胶 (各试剂使用量请参考附表)
1. 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。(注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。)
2. 将不同体积的Acr-Bis(30%,29:1)、分离胶缓冲液和蒸馏水在小烧杯或试管中混合。
3. 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4. 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1~2cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5. 静置30~60min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围如下:
按下表配制SDS-PAGE的分离胶:
1. 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。(注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。)
2. 将不同体积的Acr-Bis(30%,29:1)、分离胶缓冲液和蒸馏水在小烧杯或试管中混合。
3. 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4. 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1~2cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5. 静置30~60min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围如下:
按下表配制SDS-PAGE的分离胶:
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