细菌核糖体提取试剂盒(低速离心法)

BB-36512
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  • 50T
  • 100T
价格
  • ¥1100元
  • ¥1700元
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产品概述 product description

核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗粒(ribonucleoprotein particle),主要由RNA和蛋白质构成,其惟一功能是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器。核糖体无膜结构,主要由蛋白质(40%)和RNA(60%)构成.核糖体按沉降系数分为两类,一类(70S)存在于细菌等原核生物中,另一类(80S)存在于真核细胞的细胞质中。他们有的漂浮在细胞内,有的结集在一起。 贝博® BBproExtra® 细菌核糖体提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种细菌样品中提取总核糖体。提取过程简单方便。 需要用于动物细胞、植物、叶绿体核糖体提取试剂盒可以联系贝博选择其他货号的产品。 传统的核糖体提取方法需要采用较高的离心力或者采用密度梯度离心,对实验室离心机设备要求较高,对实验的操作细致程度要求较高。如果实验室没有能达到100000×g以上的离心力的设备,则没法进行提取。 贝博® BBproExtra® 细菌核糖体提取试剂盒(低速离心法)只需要达到20000×g以内的离心力即可提取核糖体,一般的常规台式离心机均可以满足使用要求。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.核糖体提取液B长期不用时-20℃保存。避免反复冻融。 2.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
细菌
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机2.振荡器3.Dounce匀浆器4.涡旋混匀器5.移液器6.冰箱7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
耗材准备
1.离心管2.吸头3.一次性手套
使用注意事项
 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。 如果是做核酸类下游应用,实验中所有液体以及器具均应该用DEPC处理。用0.1%的DEPC处理12小时然后高压。 下游用于蛋白质类实验的话可以不用DEPC处理。 细菌核糖体提取的关键是待提取的细胞的质量。一般来说,最好采用Rnase活性缺失的大肠杆菌样本。 细胞最好采用新鲜收集的,或者收集后立即置于-80℃保存的样本。 细胞通常培养至接近或达到对数生长期。
使用方法
1. 收集对数生长期细菌细胞,离心后尽可能吸干培养基。2. 用冷PBS洗涤两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。3. 每500 mg湿重菌体中加入1 ml冷的试剂 A和10 ul冷的试剂 B,充分混匀,置冰上30分钟。4. 用高压细胞破碎仪或超声细胞破碎仪破碎细胞。5. 在4℃,1000×g力条件下离心5分钟。弃沉淀,收集上清。6. 将上清在4℃,3000×g力条件下离心10分钟,弃沉淀,收集上清。7. 将上清在4℃,20000×g力条件下离心30分钟,弃沉淀,收集上清。8. 在上清中加入250 ul试剂C,充分混匀。9. 置2-8℃冰箱静置过夜。10. 在4℃条件下,10000×g离心20-45分钟。11. 小心移除上清,收集沉淀。12. 沉淀用适量缓冲液重悬。即得到细菌核糖体样品。【注】: 根据下游实验需要选择合适的缓冲液重悬核糖体或直接用于下游实验。13. 置冰箱备用或直接用于下游实验。

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