产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 血小板线粒体提取试剂盒适合从哺乳动物血小板中提取具有完整功能的线粒体。 提取得到的线粒体可以进行各种下游活性实验、线粒体膜电位检测、线粒体蛋白提取等实验。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 贝博® BBproExtra® 还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.长期不用可以-20℃保存。
2.试剂拆封后请尽快使用完!
2.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
血小板
产品特点
1.使用方便,不需要特殊仪器。
2.
2.
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.Tyrode's solution
2.或者CGS缓冲液/生理盐水/ PBS等
2.或者CGS缓冲液/生理盐水/ PBS等
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 取1-5ml 抗凝血,室温200×g离心10分钟。
2. 收集上层血浆,弃下层血液细胞沉淀。
3. 上层血浆室温3000×g离心20分钟。弃上清,保留沉淀。
4. 沉淀中加入500ul 血小板洗涤液A洗涤一次,3000×g离心15分钟。弃上清,保留沉淀。
5. 沉淀中加入500ul冷的线粒体提取液B,充分混匀后,在4℃条件下振荡20-30分钟。
6. 充分混匀,在4℃,2000×g条件下离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
7. 将上清在4℃,12000×g条件下离心20分钟。弃上清,收集沉淀。
8. 在沉淀中加入500μl冷的试剂C,充分混匀。
9. 在4℃,12000×g条件下离心20分钟。弃上清,留沉淀。
10. 沉淀用线粒体保存液D重悬。
11. 即得到血小板线粒体样品,置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
2. 收集上层血浆,弃下层血液细胞沉淀。
3. 上层血浆室温3000×g离心20分钟。弃上清,保留沉淀。
4. 沉淀中加入500ul 血小板洗涤液A洗涤一次,3000×g离心15分钟。弃上清,保留沉淀。
5. 沉淀中加入500ul冷的线粒体提取液B,充分混匀后,在4℃条件下振荡20-30分钟。
6. 充分混匀,在4℃,2000×g条件下离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
7. 将上清在4℃,12000×g条件下离心20分钟。弃上清,收集沉淀。
8. 在沉淀中加入500μl冷的试剂C,充分混匀。
9. 在4℃,12000×g条件下离心20分钟。弃上清,留沉淀。
10. 沉淀用线粒体保存液D重悬。
11. 即得到血小板线粒体样品,置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析
1.提取得到的线粒体如何保存?
短时间保存置4℃冰箱保存;
长期保存置-80℃保存。
2.如何提取线粒体蛋白?
如果需要提取线粒体蛋白,不用试剂D线粒体保存液重悬沉淀。根据下游实验应用,直接在沉淀中加入适量蛋白裂解液(如RIPA)裂解即可。
短时间保存置4℃冰箱保存;
长期保存置-80℃保存。
2.如何提取线粒体蛋白?
如果需要提取线粒体蛋白,不用试剂D线粒体保存液重悬沉淀。根据下游实验应用,直接在沉淀中加入适量蛋白裂解液(如RIPA)裂解即可。
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